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目的:结肠癌(colorectal cancer,CRC)发病率呈逐年上升的趋势,但目前对结肠癌的发病机制仍不清楚。钙周期素结合蛋白(Calcyclin-binding protein,Cacy BP/SIP)主要表达于细胞质中,本课题组前期研究发现,胃泌素可刺激结肠癌细胞SW480中Cacy BP/SIP发生核转位,且促进细胞增殖。本研究为进一步筛选Cacy BP/SIP入核后下游相互作用的靶蛋白,探索Cacy BP/SIP入核后下游结合分子的信号通路,探究其在结肠癌发生发展中的可能作用。方法:采用胃泌素刺激人结肠癌SW480细胞胞质中的Cacy BP/SIP进入细胞核,构建Cacy BP/SIP核转位细胞模型,用激光共聚焦扫描显微镜术和蛋白免疫印迹(Western Blot)验证细胞模型成功建立。培养未给予胃泌素刺激的结肠癌SW480细胞为未刺激组,提取造模组与未刺激组核蛋白,采用i TRAQ技术结合LC-MS/MS,筛选两组差异蛋白,行Mascot数据库检索,Go在线对差异蛋白进行功能注释聚类分析,并运用KEGG对蛋白富集的信号通路进行分析。结果:1.胃泌素刺激人结肠癌SW480细胞中Cacy BP/SIP入核,构造Cacy BP/SIP入核功能的细胞模型,蛋白免疫印迹验证Cacy BP/SIP入核功能的细胞模型成功建立。2.i TRAQ技术筛选出差异蛋白2136个,其中表达上调的有173个,表达下调的有132个。3.生物信息学分析表明,生物学过程的差异表达蛋白主要集中在生物合成过程(biosynthetic process)、细胞过程(cellular process),分子功能分类中,差异表达蛋白主要富集于结合功能(binding)、催化功能(catalyti cactivity)。细胞成分(cellular_component)的蛋白主要集中于organelle上。筛选具有结合功能、定位于细胞核且差异倍数大于1.5的蛋白,共7个,分别为PML、VDAC2、Annexin A1、UBE2、Filamin-A,Heat shock protein beta-1、Cathepsin B。Pathway代谢通路注释筛选出67条通路,其中具有显著性的通路共6条,4条通路有关键蛋白表达,分别是:Calcium signaling pathway、Ubiquitin mediated proteolysis、VEGF signaling pathway、MAPK signaling pathway.结论:i TRAQ筛选出Cacy BP/SIP入核后的差异蛋白2136个,173个上调,132个下调。差异蛋白主要集中在生物合成及细胞过程,主要定位于organelle,以结合功能为主;KEGG通路分析筛选出67条信号通路,P≤0.05的通路共6条;有意义蛋UBE2,VDAC2,Annexin A1,Filamin-A,HSPB1表达上调,PML表达下调,且表达于4条有意义通路。