6种水产病原菌16S-23SrDNA间区序列分析及检测技术

来源 :中山大学 | 被引量 : 0次 | 上传用户:huwei00
下载到本地 , 更方便阅读
声明 : 本文档内容版权归属内容提供方 , 如果您对本文有版权争议 , 可与客服联系进行内容授权或下架
论文部分内容阅读
细菌性疾病是严重危害水产养殖业健康发展的病害之一,具有暴发快、流行广、死亡率高等特点,一旦暴发,很难控制.因此,针对此类病害要以预防为主,而建立有效的检测技术,是预防细菌病暴发的重要措施.该文从患病杂色鲍和海水中分离出3株细菌,鉴定为副溶血弧菌;接着用之与5株溶藻弧菌、2株河流弧菌、2株创伤弧菌和1株荧光假单鲍菌,共5种13株菌,分别对杂色鲍稚鲍进行了人工感染;然后对上述5种水产病原菌和另一重要病原菌—嗜水气单胞菌的16S—23S rDNA间区进行了PCR扩增、克隆、测序和分析,设计出针对上述6种细菌的特异性PCR引物,建立了PCR检测方法,并初步进行了应用研究,为预防此类细菌性疾病的暴发提供了检测技术.用创伤和浸泡方式对杂色鲍稚鲍进行了人工感染实验,13株受试菌对稚鲍都具有一定程度的致病力,各菌株以创伤方式对稚鲍的感染率均高达10%,而且死亡率也较高,达50%~100%;而各菌株以浸泡方式感染稚鲍的感染率和死亡率都较低,分别为30%~70%和30%~60%,表明病原菌通过伤口比浸浴方式更容易感染鲍.根据IGS序列比较图,分别设计出4种弧菌的特异性PCR引物对荧光假单胞菌部分菌株特异的PCR引物;根据IGS序列比较图,设计出对嗜水气单胞菌特异的PCR引物.建立了上述6种病原菌的PCR检测技术,进行了特异性、灵敏性检测,发现以IGS为靶区的PCR方法特异性好,灵敏度高,对增菌液的检测低限达4.8×10<2>CFU/ml~6.3×10<2>CFU/ml.应用PCR方法对人工感染的杂色鲍、来自海南莺歌海对虾养殖场的一批凡纳(滨)对虾(Litopenaeus vannamei)及取自珠江、中大自来水、杂色鲍养殖池、对虾养殖池等不同来源的一批水样进行了检测,发现PCR方法能有效地检测出样品中的病原菌,且检测结果与经自动微生物鉴定系统的鉴定结果均保持一致,表明此检测技术是可靠的,具有很好的应用价值和前景.
其他文献
本工作旨在探讨强直电刺激右后背海马(hippocampus,HPC)诱导癫痫电网络重建过程中,HPC神经元与皮层网络或HPC内在网络的电生理及其编码特征,分析单个神经元瞬时编码(temporal
聚羟基烷酸酯(Polyhydroxyalkanoates,PHA)是许多细菌和古菌细胞内存在的生物聚酯,是一类天然的可降解高分子材料。3-羟基丁酸和3-羟基戊酸共聚酯[Poly(3-hydroxybutyrate-co-3
我国经济的不断发展,给高校大学生思想教育工作提出了新的挑战.有必要对如何加强高校思想政治教育工作的开展进行了深入探讨.建议通过问卷调查等方式,认真了解目前在校学生的
当前高校人才培养目标是做好学生综合素养的培养,实现这一目标,合理开展体育教学工作是非常重要的.高校体育发展对大学生就业具有积极的作用.针对教育理念相对陈旧、人才培养
  动脉粥样硬化(As)的形成与体内低密度脂蛋白(LDL)水平有关,LDL经氧化修饰后致动脉粥样硬化的作用增强。体外实验证实As斑块中存在的三种细胞:血管内皮细胞、平滑肌细胞和巨
在初中英语课堂教学中,“和谐互助”这种师友互助教学模式,极大地调动了学生学习的积极性和参与度.首先阐释了和谐互助的含义,以建构主义理论和合作学习理论作为和谐互助教学
随着舰船不断的大型化、自动化和智能化,舰船电力系统作为现代舰船的重要组成部分,也变得日益复杂。舰船电力系统的电能质量直接关系到舰船的行驶安全和舰员的生命安全,舰船
众所周知,胞外低渗液可引起细胞膨胀。但几乎所有的细胞随后均可不同程度地发生调节性容积减少(Regulatoryvolumedecrease,RVD),使细胞维持初始容积以发挥正常生理功能。众多研
交联聚乙烯(XLPE)电缆在电网建设与改造中得到越来越广泛的应用,而电缆接头的故障在电缆供电系统故障中占有较高比例。局部放电是反映电缆接头绝缘状况的一个很重要的参数,因此
近年来随着信息技术的发展,国内主干网基本上已实现了数字化、宽带化和光纤化,而处于网络边缘的用户接入网发展十分缓慢,成为制约互联网性能的瓶颈。PON作为解决这一瓶颈的首选