钩藤化学成分及抗氧化活性研究

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钩藤[Uncaria rhynchophylla (Miq.) Jacks]为茜草科(Rubiaceae)钩藤属(Uncaria)植物的干燥根茎,主产于云南、广西、广东等南方各省,药理作用表明:钩藤具有清热平肝、活血通经,熄风定惊,扩张血管、调节免疫的活性。其化学成分类型包括生物碱类、皂甙类、黄酮类、香豆素类、萜类、酯类、脂肪酸、烯醇、烯烃、酚类等化合物。药用植物因其产地不同,生产周期不同,其有效成分也往往有较大的差异。到目前为止,国内外学者对广西产钩藤的化学成分及药理作用研究的较少。因此,本课题选择广西产钩藤为研究对象,对其化学成分进行进一步研究,为充分利用钩藤资源提供科学依据。采用流动注射化学发光法,对钩藤的石油醚(PE)、氯仿(CE)、乙酸乙酯(AE)、乙醇(EE)以及钩藤总生物碱(Alk)等5种提取液进行抗氧化活性测定,并与维生素C进行比较,结果表明,PE、CE、AE、EE及Alk的IC50值(即:抑制率为50%时的溶液的质量浓度)分别为:20.432 mg/mL、1.547 mg/mL、0.0283mg/mL、0.00326 mg/mL、15.298 mg/mL,维生素C的IC50值为0.0223mg/mL,因此其抗氧化活性顺序依次为:EE>Vc>AE>CE>Alk>PE。钩藤干燥根经破碎,用75%的乙醇提取得粗浸膏,通过酸提碱沉法从钩藤中提取的钩藤总生物碱,反复硅胶柱层析,分离得到2个生物碱,鉴定为异钩藤碱(6)、钩藤碱(7)。同时用95%的乙醇提取得粗浸膏。按极性由小到大用石油醚、氯仿、乙酸乙酯进行萃取。利用层析技术对氯仿部位进行分离纯化,得14个单体化合物,确定了其中的9个化合物结构,分别为:金丝桃苷(1)、大黄素甲醚(2)、香草酸(3)、β-谷甾醇(4)、苯二酚(5)、豆甾醇(8)、槲皮素(9)、齐墩果酸(10)和β-胡萝卜苷(11),其中金丝桃苷(1)、苯二酚(5)和槲皮素(9)为首次从钩藤干燥根中分离得到。采用L9(34)正交试验优选钩藤脂肪酸的超临界CO2萃取工艺条件,以萃取压力、萃取温度、萃取时间、CO2流量为考察因素,确定了超临界CO2萃取钩藤茎脂肪酸的最佳条件:萃取压力40MPa,萃取温度30℃,萃取时间3h,CO2流量30L/h,利用GC/MS分析对其成分进行分离、鉴定。
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