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目的:单纯疱疹病毒（herpes simplex virus,HSV）属于疱疹病毒科成员,为有包膜的DNA病毒。根据其血清学特征的不同,HSV分为单纯疱疹病毒I型（HSV-1）和单纯疱疹病毒Ⅱ型（HSV-2）。HSV-2是最常见的人致病性病毒之一。人感染HSV-2后,病毒会长期携带,并导致反复发作性生殖器相关疾病。在静止期,HSV-2以潜伏感染的形式存在于神经节内。当机体受到某些因素刺激时,会诱发病毒激活,进而引起表皮的疱疹性损伤。对于HSV-2感染,尚缺乏有效的预防性疫苗,目前只能通过抗病毒药物进行治疗。阿昔洛韦及泛昔洛韦等核苷酸类药物为临床首选的抗疱疹病毒药物,但是长期使用该类药物会导致病毒产生耐药性。盐酸阿比朵尔是一种对多种RNA和DNA病毒具有抗病毒作用的吲哚类化合物,但水溶性差,不易吸收。因此,研发新型抗HSV-2药物迫在眉睫。基于此,本研究设计并合成了一种新药,阿比朵尔衍生物（Abidol derivative,ARD）,探讨了该衍生物在体内外的抗HSV-2作用以及潜在的抗病毒机制,以为新型抗病毒药物的研发和临床应用提供了新的手段。方法:本研究分为体外实验和体内实验两个部分。首先设计合成阿比朵尔衍生物,并在体外通过噻唑兰（MTT）比色法测定阿比朵尔衍生物对人宫颈上皮细胞（human cervical epithelial,HCE）的细胞毒性以及药物安全指数（safety index,SI）。随后,选择最大的无毒浓度通过体内外实验确定阿比朵尔衍生物抗HSV-2活性。同时,用实时定量PCR（quantitative Real Time-PCR,q RT-PCR）在转录水平检测病毒相关m RNA的表达情况,用免疫荧光试验（immunofluorescence assay,IFA）和蛋白免疫印迹实验（western blot,WB）检测病毒蛋白的表达变化。然后,通过抗病毒吸附和穿入实验以及Time-of-addition和Time-of-removal实验,进一步探究该药抗病毒作用方式及药物作用于病毒的复制时相;通过q RT-PCR与WB检测阿比朵尔衍生物对HCE细胞TLR4（Toll-like receptors,TLR4）及核转录因子NF-?B信号通路相关因子的表达影响。在体内实验部分,用HSV-2感染小鼠,构建小鼠生殖器疱疹模型,并以小鼠存活率,体重变化,生殖器组织病理变化,阴道灌洗液中病毒滴度,子宫及宫颈组织内病毒滴度,IL-6、TNF-α等细胞因子的含量和NF-κB通路相关因子的含量等指标,评价不同剂量的阿比朵尔衍生物对病毒感染鼠的治疗效果,确定药物对HSV-2感染小鼠的治疗作用。结果:在阿比朵尔分子结构基础上通过一些列化学反应引入磷酸基团提高了药物的水溶性,阿比朵尔衍生物脂水分配系数3.71758小于阿比朵尔脂水分配系数5.1770。分子式为C22H26Br N2O6PS,分子量为557。体外实验发现阿比朵尔衍生物对HCE细胞的半数细胞毒性浓度CC50为33.60μg/ml,抗HSV-2半数有效浓度EC50为3.386μg/ml。通过q RT-PCR试验显示,感染病毒的细胞经过阿比朵尔衍生物处理后,病毒g D m RNA转录明显低于病毒对照组;同时,IFA和WB结果揭示药物处理组病毒晚期蛋白g D的表达明显低于病毒对照组。这些结果表明阿比朵尔衍生物具有明显的抗HSV-2作用,能干扰病毒DNA复制及病毒蛋白表达,并且呈明显的浓度依赖关系。通过Time-of-addition和Time-of-removal实验,观察到在病毒感染早期1-12h内加入药物可以获得较高的病毒抑制率,说明药物在病毒感染早期时介入对其感染的抑制效果最为明显。体外直接灭活病毒以及抗吸附实验结果显示阿比朵尔衍生物处理组和病毒对照组的抑制率无统计学差异,提示药物对HSV-2没有直接杀伤及抗吸附作用。通过q PCR检测HSV-2的早期基因ICP8、UL42的表达,发现药物处理组ICP8、UL42 m RNA的含量显著低于对照组（P＜0.001）。此外,通过IFA和WB也发现与病毒DNA复制相关的ICP8蛋白含量在药物处理组中较对照组显著降低。与对照组比较,药物处理组TLR4、NF-κB通路相关因子的m RNA表达量以及蛋白表达量也显著降低（P＜0.01）,炎性因子IL-6、TNF-α的含量均有所降低,而IFN-β的含量则显著增高（P＜0.01）。在体内实验中,小鼠感染HSV-2后出现皮毛蓬松、反应迟钝、活动减少、烦躁不安、体重下降直至死亡。而口服给药治疗能明显降低病毒感染小鼠的死亡率,180.0 mg/kg/d和90.0 mg/kg/d剂量下的小鼠存活率和存活时间均高于病毒对照组,同时有效减轻了小鼠感染病毒导致的体重降低。观察小鼠生殖器病变,感染病毒后的第7天,病毒对照组所有感染小鼠阴道病变评分点数均达到5分,而180mg/kg/d药物处理组小鼠不超过3分,说明阿比朵尔衍生物能有效缓解HSV-2感染引起的生殖器炎症及疱疹的病理变化。通过PRA检测小鼠阴道灌洗液病毒滴度,在感染病毒后第7天,病毒对照组阴道灌洗液中病毒滴度平均为8×10~2PFU/ml,而180mg/kg/d药物组小鼠为6 PFU/ml。同样,在病毒感染的小鼠生殖器组织中,180mg/kg/d药物处理组鼠病毒拷贝数为2×10~2明显低于病毒对照组拷贝数4×10~5。通过WB检测病毒g D蛋白和NF-κB通路相关因子的蛋白含量及炎症因子IL-6、TNF-α的含量,药物组明显低于病毒对照组。这些结果表明阿比朵尔衍生物在体内对HSV-2感染具有治疗作用。结论:阿比朵尔衍生物在体内外对HSV-2都具有明显的抗病毒作用,其主要干扰病毒DNA的合成环节。其抗病毒机制可能是通过调控“TLR4/NF-k B”信号通路,从而来影响炎症因子IL-6、TNF-α表达,减轻HSV-2感染组织的炎性损害,而达到抗病毒作用。