【摘 要】
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目的:证实脐带血中含有间充质干细胞,探讨脐血与骨髓来源的间充质干细胞其体外分离、纯化及培养条件,并对其进行生物学特性比较;研究脐带血来源的间充质干细胞的分化能力和表面抗
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目的:证实脐带血中含有间充质干细胞,探讨脐血与骨髓来源的间充质干细胞其体外分离、纯化及培养条件,并对其进行生物学特性比较;研究脐带血来源的间充质干细胞的分化能力和表面抗原表达,为两种细胞进一步的研究提供理论基础。
方法:实验于2005年9月至2007年3月在哈尔滨医科大学附属第二医院中心实验室完成。无菌条件下取脐带血和成人骨髓分离、培养和纯化间充质干细胞,对获得的间充质干细胞进行形态学观察;绘制生长曲线,分析、比较两种间充质干细胞的形态和生长特性;用流式细胞仪检测脐带血间充质干细胞表面抗原的表达情况;对脐带血间充质干细胞多向分化的能力进行初步鉴定。
结果:两种来源的单个核细胞经体外培养贴壁后出现间充质样细胞,间充质细胞为成纤维样的细胞形态;原代骨髓MSCs的贴壁时间和培养时间均短于脐带血MSCs,两种细胞传代生长呈共同特性:传代培养潜伏期约为24-36小时,传代培养对数增殖期约为接种后3-7天,对数增殖期结束后至接种后8-9天,生长进入平台期;脐带血来源的表达间充质干细胞相关的抗原CD<,29>、CD<,44>、CD<,105>;但不表达造血细胞抗原CD<,34>、CD<,45>;脐带血间充质于细胞可诱导成脂肪、成骨细胞。
结论:人脐带血来源的间充质干细胞和骨髓来源间充质干细胞均可在体外分离,培养,扩增,冻存;脐带血的MSCs原代贴壁时间;形成细胞克隆的时间;集落交错融合的时间均较骨髓MSCs晚,传代培养的细胞形态,生长速度均无明显差异;脐带血间充质干细胞具有与骨髓基质干细胞相同的表面标志物;脐带血间充质干细胞有多项分化潜能,可诱导为脂肪细胞、成骨细胞。人脐带血可以作为MSCs的来源之一,为MSCs的应用研究提供实验材料。
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