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罗非鱼生长速度快、食性广,是世界上一种重要的养殖鱼类。2014年,全球罗非鱼产量达到545万吨,其中中国罗非鱼产量为169.8万吨。随着罗非鱼养殖业的快速发展,对饲料蛋白源的需求量不断增加。目前,高植物蛋白饲料在罗非鱼养殖中的应用越来越广泛。但高植物蛋白饲料适口性普遍较差,影响罗非鱼的生长和生理功能,如何通过添加适宜的促摄食物质改善罗非鱼的摄食和生长性能,并探讨其作用机制,在罗非鱼养殖中具有重要的理论意义和实际应用价值。为此,本论文研究了二甲基-β-丙酸噻亭(Dimethyl-β-propiothetin,DMPT)、二甲基-β-乙酸噻亭(Dimethylthetin,DMT)、甜菜碱(Betaine,Bet)、牛磺酸(Taurine,Tau)、色氨酸(Tryptophan,Trp)、混合核苷酸(Mixed nucleotides,Mix-NT)和鱿鱼膏(Squid liver paste,SQLP)等7种促摄食物质在吉富罗非鱼(GIFT Oreochromis niloticus)高植物蛋白饲料中的适宜添加量和对吉富罗非鱼摄食、生长的影响,并探讨了的作用机制。具体研究内容和结果如下。1.高植物蛋白饲料中7种促摄食物质的适宜添加量研究选取560尾体重为8.59±0.04 g的吉富罗非鱼,随机分为7组,每组4个重复并且独立循环。以4%鱼粉、18%豆粕、6%双低菜粕、20%巴基斯坦菜粕和19%棉粕为蛋白源,2%大豆油和3%磷脂油为脂肪源,26%面粉为糖源配制基础饲料,粗蛋白水平为354.2 g kg-1,能量为17.95 MJ kg-1。7种促摄食物质分别设置5个添加水平:DMPT0,0.2,0.4,0.6,0.8 g kg-1;DMT,0,0.2,0.4,0.6,0.8 g kg-1;Bet,0,3,6,9,12 g kg-1;Trp,0,0.6,1.2,1.8,2.4 g kg-1;Tau,0,4,8,12,16 g kg-1;Mix-NT,0,0.4,0.8,1.2,1.6 g kg-1;SQLP,0,10,20,30,40 g kg-1。在基础饲料中分别添加每一种促摄食物质的每一个添加水平,并用5种惰性元素(Y2O3、La2O3、Sm2O3、Nd2O3、Yb2O3)分别进行标记。将每一种促摄食物质的五个添加水平饲料等量混合投喂每一组罗非鱼,收集粪便,分析粪便中惰性元素比例,计算罗非鱼高植物蛋白饲料中每一种促摄食物质的适宜添加水平。结果显示,罗非鱼对7种促摄食物质偏好的适宜添加水平分别为:DMPT,0.4 g kg-1;DMT,0.6 g kg-1;Bet,6 g kg-1;Tau,16 g kg-1;Trp,1.8 g kg-1;Mix-NT,0.4 g kg-1和SQLP,30 g kg-1。2.7种促摄食物质对罗非鱼高植物蛋白饲料营养物质表观消化率的影响选取360尾体重为62.95±3.54 g的健康吉富罗非鱼随机分为8组,每组3个重复,投喂基础饲料(配方同1)和分别含有7种促摄食物质的试验饲料,其添加水平分别为DMPT,0.4 g kg-1;DMT,0.6 g kg-1;Tau,16 g kg-1;Mix-NT,0.4 g kg-1;Bet,6 g kg-1;Trp,1.8 g kg-1和SQLP,30 g kg-1。饲料以300 mg kg-1 Y2O3作为外源性指示剂。每天投喂两次,表观饱食投喂。采用捞网法收集粪便,Y2O3采用等离子发光色谱法检测。结果显示,罗非鱼对8种饲料的脂肪表观消化率没有显著差异。罗非鱼对SQLP饲料干物质、粗蛋白和能量的表观消化率显著低于其它各组饲料。DMPT饲料干物质表观消化率显著高于基础饲料。Bet饲料磷的表观消化率显著高于基础饲料组。罗非鱼对SQLP饲料中天冬氨酸、谷氨酸的表观消化率显著低于其它各试验饲料,而罗非鱼对DMPT饲料中天冬氨酸的表观消化率显著高于基础、Mix-NT和Tau饲料。3.7种促摄食物质在高植物蛋白饲料中对吉富罗非鱼摄食、生长性能、血清生化指标、消化酶活和肠道组织结构的影响在基础配方(同1)中分别添加7种促摄食物质配制7种试验饲料,其添加水平分别为:DMPT,0.4 g kg-1;DMT,0.6 g kg-1;Bet,6 g kg-1;Tau,16 g kg-1;Trp,1.8 g kg-1;Mix-NT,0.4 g kg-1;和SQLP,30 g kg-1。选取600尾体重为3.34±0.01 g的吉富罗非鱼,随机分为8组,每组3个重复,分别投喂基础饲料和7种试验饲料。饲养期为8周。结果显示,SQLP显著提高罗非鱼的摄食(FI)、末体重(FBW)和特定生长率(SGR)。Mix-NT显著提高罗非鱼的FBW、SGR和饲料效率(FE)。Bet显著提高罗非鱼的蛋白质效率(PER)和FE。7种促摄食物质对全鱼体组成没有显著影响。Trp、Bet和SQLP显著提高脏体比(VSI)。SQLP组罗非鱼血清高密度脂蛋白胆固醇(HDL-C)显著高于其它各组。Mix-NT组肠道蛋白酶活性显著高于其它各组,Bet组肠道和肝胰脏蛋白酶活性显著高于基础饲料组。DMPT、Mix-NT和Bet组肠道淀粉酶活性显著高于其它各组,SQLP组肠道淀粉酶活性显著高基础饲料组。Bet和Mix-NT组肠道褶皱长度显著高于基础饲料、DMT和Trp组。4.7种促摄食物质在高植物蛋白饲料中对吉富罗非鱼肌肉品质的影响试验饲料、分组及投喂同3.。饲养试验结束后,采集肌肉进行肌肉品质相关分析。结果显示,SQLP组肌肉粗蛋白、胶原蛋白和15种氨基酸含量、蒸煮损失和Bet组肌肉肌苷酸(IMP)和11种氨基酸含量均显著高于基础饲料组。Bet组肌肉总超氧化物歧化酶(T-SOD)活性显著高于其它各组;而其肌肉丙二醛(MDA)含量和p H24h却显著低于基础饲料组。与基础饲料组相比,Mix-NT组罗非鱼肌肉p H24h显著降低,而过氧化氢酶(CAT)活性显著升高;DMT组肌肉MDA含量显著减少,而其肌肉苏氨酸和丝氨酸含量显著增加;DMPT组T-SOD活性、肌肉蛋氨酸含量和Tau组肌肉丙氨酸含量分别显著升高;Trp组和Mix-NT组肌肉15种氨基酸含量与基础饲料组相比无显著差异。5.7种促摄食物质在高植物蛋白饲料中对吉富罗非鱼食欲相关基因表达的影响试验饲料、分组及投喂同3.。饲养试验结束后,采集脑、胃和肝胰脏,进行食欲相关基因表达量的检测。结果显示,Trp组脑神经肽Y(NPY)、脑刺鼠相关蛋白(Ag RP)、脑和胃胆囊收缩素(CCK)基因表达水平最高,其中,脑NPY基因表达水平与基础饲料组相比有显著差异;DMT组胃饥饿素(Ghrelin)基因表达水平最高,且与基础饲料组相比有显著差异;Tau组肝胰脏瘦素(Leptin)基因表达水平最高,显著高于其它各组。DMPT、Mix-NT和SQLP组食欲相关基因表达水平与对照组相比没有显著差异。6.7种促摄食物质在高植物蛋白饲料中对吉富罗非鱼血清GH、IGF-I含量及生长轴相关基因表达量的影响试验饲料、分组及投喂同3.。饲养试验结束后,采集血清检测GH、IGF-I含量,采集脑和肝胰脏检测生长轴相关基因表达量。结果显示,SQLP能显著提高血清IGF-I含量和脑GH m RNA表达。Mix-NT能显著提高血清IGF-I含量和脑GH、肝胰脏GHR、IGF-I m RNA表达量。Bet能显著提高脑GH m RNA表达量。DMPT、DMT、Trp和Tau对相关指标作用不显著。综上所述:(1)SQLP对罗非鱼能显著提高吉富罗非鱼摄食、生长性能和肌肉粗蛋白含量,与食欲相关基因没有明确的相关性。SQLP一方面能提高摄食促进罗非鱼的生长,同时促进生长轴相关因子分泌表达促进生长。(2)Mix-NT对吉富罗非鱼长期摄食提高作用均不显著,与食欲相关因子没有明确的相关性。Mix-NT能显著提高吉富罗非鱼特定生长率和饲料效率,这可能与消化酶的活性提高以及肠道组织结构改善有关;生长轴相关因子的分泌表达增加也起到一定作用。(3)Bet对吉富罗非鱼长期摄食没有显著的促进作用,但能显著提高罗非鱼的蛋白质效率和饲料效率以及肌肉蛋白含量,其机理可能在于一方面提高消化酶活性,改善肠道组织结构,提高磷的消化率,另一方面提高GH m RNA的表达。(4)DMPT、DMT和Trp对吉富罗非鱼长期摄食和生长性能没有显著的促进作用,但Trp和DMT能分别促进食欲相关因子的m RNA表达量。(5)Tau对吉富罗非鱼有抑制摄食和生长性能的趋势,同时肝胰脏中抑摄食因子Leptin被显著提高。