奥曲肽对前列腺癌pc-3细胞SMAD4表达影响的实验研究

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目的:观察奥曲肽(octreotide,OCT)对前列腺癌Pc-3细胞Smad4表达的调节及其对该细胞的抑制作用。方法:分别用浓度为0.1.0.3.1.0.3.0mg/L的奥曲肽对体外培养的人前列腺癌PC-3细胞进行药物处理,24h、48h、72h后,以MTT法测量OCT对Pc-3细胞增殖的影响,荧光显微镜下观察细胞形态的变化,以RT-PCR观察Smad4mRNA的表达。结果:1、对照组(不加药组)PC-3细胞生长活跃,不同浓度的奥曲肽(0.1、0.3、1.0.3.0mg/L)分别作用24小时后,存活率分别为(0.971±0.016)%、(0.853±0.015)%、(0.717±0.031)%、(0.743±0.029)%,作用48小时后的存活率分别为(0.918±0.015)%、(0.835±0.015)%、(0.682±0.018)%、(0.727±0.014)%,作用72小时后的存活率分别为(0.922±0.017)%、(0.841±0.013)%、(0.717±0.017)%、(0.739±0.003)%,组间比较差别有显著统计意义(P<0.01);2、普通显微镜下观察细胞形态变化对照组24、48、72小时细胞形态正常,细胞呈梭形,胞核清晰可见,未见有细胞脱落漂浮;实验组中不同浓度奥曲肽处理后细胞均有不同程度脱落漂浮,以48小时1.0mg/L浓度最明显,且细胞出现颗粒增加和肿大等中毒现象3、荧光显微镜下对照组细胞核完整均一,着色暗淡,形态规则,可见少量染色质凝聚;药物作用后尤其是48、72小时后均可见大部分细胞质染色不均匀,染色质凝聚,细胞核裂解,可见核碎裂及凋亡小体。4、不同浓度奥曲肽作用48小时后Smad4 mRNA表达指数分别为0.113±0.006、0.227±0.025、0.546±0.027、0.552±0.009,均较对照组(0.027±0.002)表达下降,差别有显著统计意义(P<0.01),1.0mg/L的奥曲肽作用24、48、72小时后,Smad4 mRNA表达指数分别为0.087±0.002、0.461±0.038、0.418±0.017,差别亦有显著统计意义(P<0.01)。结论:1、奥曲肽对于前列腺癌细胞有生长抑制作用,并有一定的时间和浓度依赖性2、奥曲肽明显上调了体外培养前列腺癌细胞的Smad4 mRNA的表达,有可能是奥曲肽抑制前列腺癌细胞生长的机制之一
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