本论文以白三叶(Trifolium repens)为研究对象,分别在模拟冻融、模拟冻融及酸沉降、自然冻融三种条件下,对可溶性蛋白、可溶性糖、脯氨酸、丙二醛(MDA)含量变化趋势以及超氧化物歧化酶(SOD)、过氧化氢酶(CAT)、过氧化物酶(POD)活性变化特征进行测定分析,来揭示白三叶对冻融及酸沉降复合胁迫的响应特征,为进一步探明低纬度喜温植物对高纬度寒冷环境多年以来适应进化机理提供科学依据。冻融试验中,融-冻阶段降温至-5℃时,白三叶叶片和匍匐茎可溶性蛋白、脯氨酸含量均达到最大值,继续降温,含量均降低。MDA含量随胁迫的增加而升高,且匍匐茎中含量高于叶片,说明融冻胁迫过程对匍匐茎损伤程度较大。可溶性糖含量在融-冻阶段变化不显著,而在冻-融阶段,其含量迅速升高。叶片中积累的可溶性蛋白含量高于匍匐茎中,而可溶性糖、脯氨酸含量则在匍匐茎中更高。叶片SOD、CAT、POD均在降温至-5℃时活力最大,而匍匐茎则在-10℃时活性最大,三种酶在功能上表现为协同作用。SOD、CAT活力匍匐茎中更高,POD活力叶片中更高。冻融及酸沉降复合胁迫实验中,脯氨酸、MDA含量,SOD、POD活力均高于单一冻融组,而可溶性蛋白、可溶性糖由于大分子物质的分解,在单一冻融组含量稍高一些。随着自然冻融胁迫的增加,白三叶匍匐茎可溶性蛋白含量先升高后降低,可溶性糖、丙二醛含量均随着胁迫的加重而增加。无论在冬季还是春季,经历融-冻胁迫(气温降至零度以下)均会引起匍匐茎脯氨酸含量的增加,在最低温时,含量达到最大值。当自然冻融胁迫增强时,SOD、CAT变化趋势相似,活力均随着温度的降低而增加,而POD活力先降低后增加。其中SOD活力最强,可以消除超氧阴离子自由基,从而削弱膜脂过氧化的作用,保护质膜不受自由基的破坏,维持体内活性氧代谢平衡,从而对机体起保护作用。春季可溶性蛋白、MDA的含量以及抗氧化酶活性均高于冬季。取样时气温与各指标含量之间差异显著(P<0.05)。无论在模拟还是真实冻融胁迫条件下,脯氨酸、丙二醛含量的变化趋势均一致,即随着温度的降低,积累量都增加,但自然冻融积累量高于模拟冻融。抗氧化酶系统的活性在自然冻融状态下始终表现出比模拟冻融活性高,说明随着季节的变化,冬季的白三叶更能抵抗低温侵害,保护膜系统减少伤害,抵抗冻融胁迫的能力更强。白三叶对环境气温变化可做出响应,即通过快速激活抗氧化酶系统以及不断累积渗透调节物质两种途径进行调解,以达到抑制膜脂过氧化的作用,维持白三叶组织细胞正常的水分平衡。