单核细胞趋化蛋白-1、细胞间粘附分子-1在病毒性面瘫小鼠脑干面神经核团的动态表达及意义

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研究目的:通过建立1型单纯疱疹病毒(herpes simplex virus type 1, HSV-1)导致小鼠面瘫的动物模型,探讨单核细胞趋化蛋白-1(monocyte chemoattractant protein-1, MCP-1)在病毒性面瘫小鼠脑干面神经核团中表达的变化规律及糖皮质激素对MCP-1表达的作用。实验方法:将170只Balb/c雄性四周龄小鼠随机分为病毒接种组(135只),生理盐水对照组(26只)和空白对照组(9只)。病毒接种组中面瘫小鼠又分为A、B、C亚组,用于干预的药物为甲基泼尼松龙琥珀酸钠(methylprednisolone sodium succinate, MPSS)和糖皮质激素受体阻断剂(RU486)。A组不进行任何药物干预,B组为应用MPSS进行干预组,C组为应用MPSS+RU486干预组。将HSV-1接种至小鼠耳廓背面皮肤建立面瘫动物模型,评估小鼠面神经功能,用实时荧光定量PCR(real-time PCR)、蛋白质印迹法(western blot)及免疫组化技术检测小鼠脑干面神经核团中MCP-1的表达。实验结果:1.在病毒接种组小鼠中有95只(55.88%)于接种后2-5天出现不同程度的面瘫症状,取其中65只进入本部分研究。2.免疫组化检测显示,面瘫后MCP-1蛋白在脑干面神经核团中神经元胞浆、细胞间质表达增强,与空白对照组相比差异有统计学意义(P<0.05)3. MCP-1 mRNA在生理盐水组小鼠脑干面神经核团表达处于低水平,与空白组相比差异无统计学意义(P>0.05)。在病毒接种组小鼠,面瘫后6h可见MCP-1mRNA表达升高,2d达到高峰,与空白对照组相比差异有统计学意义(P<0.01),此后表达逐渐降低并趋于正常(P>0.05)。4.MCP-1蛋白在生理盐水组小鼠脑干面神经核团表达处于低水平,与空白组相比差异无统计学意义(P>0.05)。在病毒接种组小鼠,面瘫后6h可见MCP-1蛋白表达升高,2d达到高峰,与空白对照组相比差异有统计学意义(P<0.01),此后表达逐渐降低,但仍高于空白对照组(P<0.05)5.在HSV-1+MPSS组,MCP-1蛋白的表达在面瘫后第2天明显下降(P<0.05)。6.在HSV-1+MPSS+RU486组,MPSS对MCP-1蛋白表达的抑制作用被减弱(P<0.05)。研究结论:1.提示MCP-1参与了HSV-1致小鼠面瘫的病理过程。2. MPSS对于贝尔面瘫的治疗作用可能通过对MCP-1的抑制作用来实现。研究目的:探讨细胞间粘附分子-1(intercellular adhesion molecule.1,ICAM-1)在病毒性面瘫小鼠脑干面神经核团中表达的变化规律及糖皮质激素对ICAM-1表达的作用。实验方法:取第一部分实验中A、B、C组标本进入本部分实验研究。用实时荧光定量PCR(real-time PCR).蛋白质印迹法(western blot)及免疫组化技术检测小鼠脑干面神经核团中ICAM-1的表达。空白对照组标本亦取自第一部分实验。实验结果:1.免疫组化检测显示,面瘫后ICAM-1蛋白在脑干面神经核团神经元胞浆、膜表达增强,与空白对照组相比差异有统计学意义(P<0.05)。2.ICAM-1mRNA在生理盐水组小鼠脑干面神经核团表达处于低水平,与空白组相比差异无统计学意义(P>0.05)。在病毒接种组小鼠,面瘫后6h可见ICAM-1mRNA表达升高,2d达到高峰,与空白对照组相比差异有统计学意义(P<0.01),此后表达逐渐降低并趋于正常(P>0.05)3.ICAM-1蛋白在生理盐水组小鼠脑干面神,经核团表达处于低水平,与空白组相比差异无统计学意义(P>0.05)。在病毒接种组小鼠,面瘫后6h可见ICAM-1蛋白表达升高,2d达到高峰,与空白对照组相比差异有统计学意义(P<0.01),此后表达逐渐降低,但仍高于正常(P<0.05)。4.在HSV-1+MPSS组,ICAM-1蛋白的表达在面瘫后第2天明显下降(P<0.05)。5.在HSV-1+MPSS+RU486组,MPSS对ICAM-1蛋白表达的抑制作用被减弱(P<0.05)。研究结论:1.提示ICAM-1参与了HSV-1致小鼠面瘫的病理过程。2.MPSS对于贝尔面瘫的治疗作用可能通过对ICAM-1的抑制作用来实现。研究目的:探讨单核细胞趋化蛋白-1抑制剂Bindarit对病毒性面瘫小鼠脑干面神经核团中MCP-1、ICAM-1表达的影响,确定MCP-1与ICAM-1是否存在相关性。实验方法:取第一部分实验中30只面瘫小鼠进入本部分实验研究。应用Bindarit连续干预2d后取小鼠脑干面神经核团标本。用蛋白质印迹法(western blot)检测小鼠脑干面神经核团中MCP-1及ICAM-1的表达。空白对照组标本亦取自第一部分实验。实验结果:1. Bindarit干预后,MCP-1蛋白的表达在面瘫后第2天明显下降(P<0.05)。2. Bindarit干预后,ICAM-1蛋白的表达在面瘫后第2天明显下降(P<0.05)。MCP-1及ICAM-1的变化一致。研究结论:1.单核细胞趋化蛋白-1抑制剂Bindarit能降低HSV-1致病毒性面瘫小鼠脑干面神经核团中MCP-1及ICAM-1的表达。2.MCP-1与ICAM-1存在相关性。
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