土壤硝化强度整合分析及基于测序的微生物调查方法评价

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稍化作用是氮素循环的关键环节,主要由硝化微生物驱动。微生物受当代环境因素和历史地理因素影响,在地表按照一定规律分布。硝化强度表示硝化过程的快慢,是硝化微生物功能的表征,可能也呈现出一定的格局。  本研究首先针对国内外自1959年至2013年间发表的2900篇土壤硝化相关论文,获得288组中国土壤硝化强度数据,初步构建了开放式的中国土壤硝化信息系统。整合分析结果表明:不同生态系统之间硝化速率由大到小依次为:农田(NO3--N1.39±0.27 mg kg1 d-1)、草地(0.74±0.17)、森林(0.66±0.16)、沙漠(0.17±0.08)、湿地(0.06±0.04)。在统计显著性的前提下,硝化强度与环境因子表现出一定的相关性趋势:即硝化强度与pH、有效磷、硝态氮正相关,与有机碳、速效氮和碳氮比负相关。在较大时空尺度下,生态系统类型是土壤硝化过程地理分异规律的最优解释因子,可能在硝化微生物形成与演替过程中发挥了重要作用。  硝化微生物群落结构的准确测定是揭示其功能分布格局的基础。本研究通过对同一土壤微生物群落进行大规模重复测序,对基于测序的硝化微生物调查方法进行评价。结果表明,大规模重复测序获得的硝化微生物相对丰度服从正态分布,与内标的检测结果相似,测序技术可以反映硝化微生物群落的真实情况。同时,测序结果存在一定变异,随着不同类型硝化微生物相对丰度的降低,变异逐渐增大;对部分微生物的相对丰度与变异进行拟合,发现存在良好的对数线性关系(r=0.875,p=0.000)。本研究中硝化微生物相对丰度在1%左右,设置3个测序重复可以将测序丰度相对误差控制在10%以内并达到80%以上的置信度,对于小于1%的硝化微生物需要设置更多重复以及增加测序深度以保证测序结果的可靠性。  本研究初步构建了土壤硝化数据库,并对微生物群落测序方法进行定量评价,为后期土壤硝化分布格局及其微生物学机制揭示提供数据共享平台和技术保障。
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