研究背景：　　肌萎缩侧索硬化(amyotrophic lateral sclerosis，ALS)是神经系统的一种慢性进行性致死性疾病，以脑和脊髓中选择性运动神经元变性为特征，是神经系统变性疾病领域研究重点课题之一。其患病率4/10万～6/10万，发病率1/10万～2/10万，平均存活时间31～43个月。ALS的病因及发病机制至今尚未明确。目前ALS的诊断，除了肌电图对下运动神经元损害具有诊断意义外，对上运动神经元损害判断缺乏公认指标。现代研究发现神经微丝蛋白（NF）是神经细胞支架结构最主要的组成成分，磷酸化的神经微丝蛋白（Phosphorylated Neurofilament Protein H;pNF-H）与运动神经元变性可能存在一定的相关性。　　传统中医药治疗对改善ALS临床症状或延缓疾病发展有潜在的疗效，但医者的经验及辨证水平存在个体差异，未能充分发挥中医药治疗ALS的优势。因此，如何运用现代的研究成果提高中医药治疗ALS水平也是当今研究的一个新方向。　　研究目的：　　本研究拟通过检测ALS患者脑脊液及血清中pNF-H表达水平，探讨其与ALS患者病程、病情严重程度、起病部位可能存在的相关性；进行中医证候分级量化积分，探讨ALS患者pNF-H表达水平与肺脾两虚证及证候间可能存在的相关性。　　研究方法:　　1、收集病例：2010年3月～2012年10月就诊于我院神经科，诊断级别属于确诊或拟诊ALS患者25例。同期选取我院麻醉科需行腰麻或腰硬联合麻的无神经系统疾病的手术病人25例。　　2、收集标本：签署知情同意后，行腰椎穿刺术，收集脑脊液3ml，同时抽取静脉血5ml，离心、分管，-80℃保存以备用。　　3、进行实验：实验通过酶联免疫吸附剂测定（ enzyme linked immunosorbent assay，ELISA）的方法，检测两组（ALS组、对照组）血清及脑脊液中pNF-H表达水平。　　4、数据比较：将数据输入SPSS17.0进行统计学分析，比较ALS组血清及脑脊液pNF-H表达水平与对照组间的差异；探讨在不同起病部位、病程、病情严重程度中ALS组血清及脑脊液pNF-H表达的差异；参照《中药新药临床研究指导原则》中的肺气虚证、脾气虚证诊断标准，以及《中医量化诊断》通过进一步细化肺气虚证、脾气虚证及《中医诊断学》中肺脾两虚证的中医证候分级量化积分,把症状分为无、轻度、中度、重度4级，分别予以0分、1分、2分、3分，进行证候积分，初步探讨肺脾两虚证患者在脾气虚证、肺气虚证、肺脾两虚证及主要证候（肌无力、肌萎缩、肌肉瞤动、神疲乏力、倦怠懒言）中不同证候积分与pNF-H表达水平的相关性。　　研究结果:　　1、一般资料：本研究共纳入肌萎缩侧索硬化患者25例，其中男性患者17人，女性患者8人，男女比例为2.12:1。本组患者最大发病年龄为77岁，最小发病年龄为31岁，平均发病年龄为52.84±12.85岁；病程最长者48个月，最短者3个月，平均病程在20.23±14.31个月。参照ALS健康状态量表（ALS/HSS），本组患者以2期（中度）为主，共21人，占84%；1期（轻度）、3期（重度）均有2例，各占8%。本组患者起病部位以颈段（上肢症状）为主，有17例，占68%；延髓段有5例，占20%；腰段有3例，占12%。职业方面，本组病人多为工人、农民等体力劳动者为主，占56%；其中有5人有明确的化学物/毒物接触史，占20%。既往史方面，本组病人以合并高血压、糖尿病、高脂血症等内科疾病的占多数。　　2、中医证候积分：本组患者中医辨证均为肺脾两虚证，其中肺气虚主症：气短喘促、气短声怯、咳声低微出现率为48～72%，次证中以神疲懒言出现率最高，占88%，其次为舌淡、脉细、咯痰、自汗出现频率依次降低（52～80%），息弱出现频率最低为32%。肺气虚证候积分方面，以0～8分内人数最多，共18人，占总数72%。本组患者脾气虚主症：食少纳呆、倦怠乏力出现率依次为64～92%，次证中以肌无力、肌萎缩、肌肉瞤动、神疲懒言、倦怠乏力出现率最高，占88～100%，其次为形体消瘦、舌淡、面色萎黄、脉细出现频率依次降低（68～80%），流涎出现频率较低为52～40%。其证候积分以9分以上人数最多，占总数44%，5～8分段有9人，占36%，0～4分人数最少，占20%。本组ALS患者肺脾两虚证证候中以肌无力、肌萎缩、肌肉瞤动、倦怠乏力、神疲懒言、形体消瘦、舌淡出现频率最高，为80～100%；声短气怯、面色萎黄、脉细、食少纳呆、构音不清、咳痰、自汗出现频率依次降低（52～72%）；气短喘促、咳声低怯、吞咽、流涎、息弱出现频率较低（36%～48%）。其肺脾两虚证证候积分以20～29分人数最多，占36%，其次为10～19分，占32%，30分以上者共占32%。　　3、pNF-H表达水平：统计结果显示，25例肌萎缩侧索硬化患者血清及脑脊液中pNF-H表达水平明显高于对照组，具有统计学意义（P=0.00）；ALS组脑脊液中pNF-H表达与病情严重程度（ALS/HSS）存在负相关，在1期（轻度）患者中表达水平最高，在3期（重度）表达最低，具有统计学意义（P=0.0027）；与起病部位、病程时间长短无明显相关性，无统计学差异(P>0.05)；与脾虚证、肺虚证、肺脾两虚证之间无明显相关性，无统计学差异(P>0.05)；与主要证候（肌无力、肌萎缩、肌肉瞤动、神疲乏力、倦怠懒言）证候积分无明显相关性，无统计学差异(P>0.05)。　　研究结论:　　pNF-H在ALS患者血清及脑脊液中表达水平增高，脑脊液中pNF-H表达水平在1期（轻度）患者中最高，在3期（重度）最低，与病程时间长短、发病部位无统计学相关性，与脾虚证、肺虚证、肺脾两虚证及痿证主要证候积分无统计学相关性。pNF-H作为神经细胞丢失过程中的产物，或可作为评估肌萎缩侧索硬化病情严重程度的一个临床指标。