【摘 要】
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随着传统农药纷纷被禁用,新型农药成为农民的首选。虽然新型农药与传统农药相比具有活性高、毒性小、单位用量少等优势,但是施用的农药,只有很少部分作用于靶标,而大部分残留
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随着传统农药纷纷被禁用,新型农药成为农民的首选。虽然新型农药与传统农药相比具有活性高、毒性小、单位用量少等优势,但是施用的农药,只有很少部分作用于靶标,而大部分残留于土壤中,造成了生态环境的严重破坏。目前国内外对于新型农药降解菌的分离、筛选及其降解能力、降解机理的研究还处于初级阶段,因此从土壤中分离新型农药降解菌,并分析其降解效果,可以为治理环境污染,发展绿色农业提供理论依据,具有重要意义。本文首先利用PCR-DGGE技术分别分析了精喹禾灵、氟虫腈和氟磺胺草醚胁迫下土壤细菌群落结构及多样性的变化。结果表明,在三种农药分别胁迫下,土壤细菌群落结构均发生了明显的改变。其中,精喹禾灵使细菌多样性呈现出先减少后增加的趋势,氟虫腈和氟磺胺草醚使细菌多样性呈现出先增加后减少的趋势。根据DGGE图谱条带的测序结果分别推断出了对精喹禾灵、氟虫腈和氟磺胺草醚具有耐受性,或具有降解它们潜力的微生物类群,这些类群可作为减少农药残留的土著微生物资源进行分离筛选。从自然环境中分离到的可降解农药的土著微生物,因其对环境的友好性及原位修复的可行性,受到了高度关注。因此本研究将现代分子生物学中菌落原位杂交技术与传统平板培养的方法相结合,利用DGGE图谱中条带的测序结果,合成DIG标记的探针,有针对性地从上壤微生物中筛选降解菌,得到了1株可降解精喹禾灵的菌株,命名为L1,生理生化鉴定及16S rRNA基因测序结果表明该菌株属于假单胞菌属(Pseudomonas sp.)。该菌株能以精喹禾灵作为唯一碳源生长,培养7天后,精喹禾灵的含量减少了近50%。这一结果为今后研究L1降解精喹禾灵的机理、功能基因等奠定了基础。
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