胆汁酸（BAs）是一类重要的脂肪酸,参与许多重要的病理生理过程,包括维持脂质、能量及糖类稳态。然而,由于其化学结构的差异及在生物基质中含量较低且丰度差异大使得其准确定量分析仍具有一些挑战。随着分析仪器的不断发展,液相色谱-质谱联用（LC-MS）已成为分析胆汁酸的重要手段。但BAs的分析仍存在离子化效率低及基质复杂等问题。因此需要开发适合于复杂生物样品中胆汁酸的高灵敏度和高选择性的分析方法。肥胖已在世界范围内发展,并且与心血管疾病、高血压、高血脂、2型糖尿病及脂肪肝等疾病密切相关。基于BAs在维持脂质、糖类及能量代谢稳态中的作用,BAs也与肥胖关系密切。已有多篇报道涉及BAs对肥胖的影响及肥胖中BAs的变化的研究,但BAs的肝肠循环与肥胖的关系仍处于未知,BAs的代谢与肥胖的发病机制是否相关有待进一步探究。针对上述问题,本文主要的研究内容是开发胆汁酸的液相色谱-质谱联用的分析方法,并探究胆汁酸代谢在肥胖中的作用。具体工作分为以下两方面:1.基于稳定同位素探针标记和超高效液相色谱-质谱联用,建立了一种同时测定生物样品中包括游离型和结合型胆汁酸在内的20种胆汁酸化合物的高灵敏度方法。该方法利用2-二甲氨基乙胺（DMED）和d4-DMED两种稳定同位素标记试剂分别标记生物样品和胆汁酸标准品,将样品混合后进入UHPLC-MS/MS进行分析。结果表明,经过DMED标记后胆汁酸的检测灵敏度提高了1-1539倍。利用UHPLC技术,在C18柱上16min内即可实现对胆汁酸异构体的高效分离。该方法灵敏度高,特异性强,线性动力学范围宽（3个数量级）,并可适用于多种复杂生物样品,包括血清、小鼠肝脏、粪便以及细胞。将该方法应用于不同种类细胞内胆汁酸的测定,首次实现了对293T﹑Hela、HL-7702及Huh7.5细胞中胆汁酸的定量分析。2.将上述方法应用于肥胖模型小鼠中胆汁酸代谢的研究,在肝肠循环涉及的小鼠肝脏、小肠、结肠和粪便中分别检测到19﹑19﹑19及17种胆汁酸。与标准饲料喂养小鼠相比,肥胖小鼠的粪便总胆汁酸含量升高,而小肠中总胆汁酸含量降低。且在肥胖小鼠肝脏﹑小肠﹑结肠﹑粪便中DCA/CDCA升高。在粪便中,DCA﹑CA﹑HDCA含量在肥胖小鼠中显著升高;在结肠中,DCA﹑HDCA﹑ACA含量在肥胖小鼠中显著升高;在小肠中,CA及7-KDCA含量在肥胖小鼠中显著降低;在肝脏中,CA﹑CDCA﹑ACA﹑7-KDCA含量在肥胖小鼠中显著降低,而HDCA含量显著升高。这为这些胆汁酸作为肥胖的潜在标志物提供了可能。此外,我们发现肥胖小鼠与WT小鼠肠道菌群落差异明显,且肥胖小鼠中梭菌丰度升高而拟杆菌丰度降低。这说明胆汁酸的代谢可能与肥胖的发病机制有关,在肥胖发生中扮演着重要角色。