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目的：利用荧光定量聚合酶链反应(FQ-PCR)方法定量分析KPNA5和GSTm3基因在重症肌无力(MG)患者胸腺与正常胸腺组织中的mRNA表达水平，并利用免疫组织化学染色的方法对KPNA5蛋白在胸腺中的表达进行组织定位，探讨两基因与重症肌无力发病的相关性，从而对今后MG的病因研究及进一步的生物治疗奠定基础。
方法：
实验一：首先构建重组质粒pGEM-T-β-actin作为内参，提取重组质粒稀释后行荧光定量聚合酶链反应(FQ-PCR)扩增确定标准曲线，从临床上20例重症肌无力(MG)患者和10例先天性心脏病患者切除的胸腺组织中提取总RNA，逆转录合成目的基因KPNA5和GSTm3的cDNA，通过荧光定量聚合酶链反应(FQ-PCR)扩增内参β-actin以及KPNA5和GSTm3基因，测定β-actin基因与KPNA5和GSTm3基因的CT值，分别以每例标本KPNA5基因与β-actin基因、GSTm3基因与β-actin基因CT值之比，作为该例标本目的基因的相对表达量。
实验二：30例标本经梯度温度解冻至-30℃，做冰冻切片，用KPNA5抗体作为一抗，以PBS液代替一抗作阴性对照，按S-P试剂盒说明书进行免疫组化染色，在光学显微镜下对KPNA5蛋白在胸腺中的表达进行组织定位。
结果:
1.KPNA5基因在重症肌无力患者和正常人胸腺组织中的mRNA表达水平分别为0.71±0.08和0.57±0.02，两者之间的差异有显著的统计学意义(P<0.01)。
2. GSTm3基因在重症肌无力患者和正常人胸腺组织中的mRNA表达水平分别为0.67±0.10和0.58±0.05，两者之间的差异有明显的统计学意义(P<0.01)。
3. KPNA5蛋白在胸腺中主要表达在胸腺小体，在40倍显微镜下，阳性染色的胸腺小体在重症肌无力患者和正常人胸腺组织切片中计数分别为5.88±0.69和8.99±0.49，两者之间的差异有明显的统计学意义(P<0.01)。
结论：
1.KPNA5和GSTm3基因与重症肌无力(MG)密切相关，可能参与MG发病，推测两基因为MG的致病基因或相关基因。
2.KPNA5蛋白在胸腺中主要表达在胸腺小体，胸腺小体数量的减少可能是MG患者胸腺增生的原因之一，并可能参与了MG的发病机制。