SH-SY5Y细胞交叉污染的鉴定

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在以细胞系为研究模型的正常生理、肿瘤病理及药物研发领域,有效数据的获得常常依赖于正确细胞系的选择。近些年来细胞系交叉污染和错误鉴定的案例时有报道;细胞系污染不仅将产生无效数据,也会对后续研究造成极大影响,必须引起重视。在研究物种间水平基因转移的过程中发现,小鼠基因组DNA探针杂交到本室的人SH-SY5Y基因组DNA上时出现很强的杂交信号,推测该株细胞中含有大量的小鼠细胞。本研究课题分别利用PCR扩增、基因文库克隆、染色体计数、细胞形态观察、southerndotblot、STR指纹图谱技术分析从不同实验室收集到的7株SH-SY5Y细胞或DNA样本的物种属性。研究结果表明,SH-SY5Y细胞系污染不是个例,7株SH-SY5Y细胞系中仅有3株细胞是真正的SH-SY5Y细胞,而另外4株细胞基本为小鼠细胞,提示在各实验室使用的SH-SY5Y细胞可能存在相当程度的污染或错误标记。另外,研究还提示,如果只是鉴定小鼠细胞污染的存在,DNA杂交结合部分片段PCR或测序,将是一个比较经济有效的污染鉴定策略,而无须使用STR指纹分析技术。
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