【摘 要】
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目的:观察脓毒症时大鼠膈肌神经肌肉接头处乙酰胆碱酯酶（acetylcholinesterase,ACh E）活性的变化并探讨其可能的机制。方法:第一部分:采用盲肠结扎穿孔法制备大鼠急性脓毒症模型,术后24 h时测定0.1或0.5μmol/L新斯的明拮抗10μmol/L罗库溴铵所致膈肌单收缩张力抑制的时间效应曲线,同时用改良的Karnovsky和Roots法测定膈肌神经肌肉接头处ACh E的活性,实
【基金项目】
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国家自然科学基金（81171845）；
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目的:观察脓毒症时大鼠膈肌神经肌肉接头处乙酰胆碱酯酶（acetylcholinesterase,ACh E）活性的变化并探讨其可能的机制。方法:第一部分:采用盲肠结扎穿孔法制备大鼠急性脓毒症模型,术后24 h时测定0.1或0.5μmol/L新斯的明拮抗10μmol/L罗库溴铵所致膈肌单收缩张力抑制的时间效应曲线,同时用改良的Karnovsky和Roots法测定膈肌神经肌肉接头处ACh E的活性,实时RT-PCR法检测膈肌ACh E和ACh ET m RNA的表达。第二部分:采用盲肠结扎穿孔法制备大鼠急性脓毒症模型时,于术后给予N-乙酰半胱氨酸和去铁胺治疗。术后24 h时取膈肌测定丙二醛（malondialdehyde,MDA）含量、ACh E及髓过氧化物酶（myeloperoxidase,MPO）、超氧化物歧化酶（superoxide dismutase,SOD）、过氧化氢酶（catalase,CAT）的活性。计算SOD/CAT比值。第三部分:采用盲肠结扎穿孔并于术后给予抗生素治疗的方法建立大鼠慢性脓毒症模型。分别在术后的第1、3、7和14 d,通过改良的Karnovsky和Roots法来检测膈肌神经肌肉接头处ACh E的活性,同时分别通过免疫组织荧光染色和Western blot来检测ACh E在膈肌神经肌肉接头处和整个肌纤维的表达。结果:第一部分:急性脓毒症时两种浓度的新斯的明拮抗罗库溴铵所致膈肌单收缩张力抑制的时间效应曲线都上移,同时膈肌神经肌肉接头处ACh E的活性降低,膈肌ACh E和ACh ET m RNA的表达减少。第二部分:急性脓毒症时膈肌ACh E活性降低,MDA含量、MPO活性以及SOD/CAT比值升高,CAT活性降低;给予抗氧化剂治疗后,膈肌ACh E活性升高,MDA含量、MPO活性以及SOD/CAT比值降低,CAT活性升高。第三部分:慢性脓毒症时膈肌神经肌肉接头处ACh E的活性和表达都从术后第1 d开始逐渐下降并在第7 d降到最低,然后在第14 d部分恢复,两者之间成正相关。膈肌纤维ACh E蛋白的含量在术后也降低,最低值出现在第3 d。结论:脓毒症可降低大鼠膈肌神经肌肉接头处ACh E的活性从而增强新斯的明对罗库溴铵所致膈肌单收缩张力抑制的拮抗作用。氧化应激可能参与了脓毒症时大鼠膈肌ACh E活性降低的过程。ACh E活性的降低还可能与脓毒症时神经肌肉接头处ACh E表达的减少有关。
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