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目的研究三种粒径的磁性纳米四氧化三铁颗粒(Magnetic nanoparticles of Fe3O4,Mg NPs-Fe3O4)对乳腺癌细胞毒性的影响,及其在逆转乳腺癌细胞多药耐药中的作用,并探讨其机制。方法(1)选取乳腺癌细胞MCF-7与Mg NPs-Fe3O4共培养,采用CCK8实验和Ed U实验检测7nm,9nm,11nm三种粒径、不同浓度的Mg NPs-Fe3O4对MCF-7增殖的影响。然后用流式细胞术研究Mg NPs-Fe3O4对MCF-7凋亡率和细胞周期的影响。利用TEM检测Mg NPs-Fe3O4作用于MCF-7后在细胞内的分布情况。利用谷胱甘肽含量检测方法和活性氧含量检测方法进一步研究Mg NPs-Fe3O4对MCF-7细胞氧化损伤的影响。利用Real-time PCR方法检测氧化应激相关基因的表达变化。利用Western Blot方法观察氧化应激相关蛋白表达水平的改变。(2)选取乳腺癌耐药细胞株MCF-7/ADR,分为对照组、Mg NPs-Fe3O4组、表柔比星(EPI)组和EPI+Mg NPs-Fe3O4组。利用CCK8实验检测乳腺癌MCF-7/ADR细胞增殖作用的影响。利用Hoechst33342法检测对MCF-7/ADR细胞凋亡能力的影响。Real-time PCR方法检测耐药基因ABCB1、ABCG2 m RNA表达水平变化,蛋白印迹法检测耐药蛋白P-gp、BCRP的表达水平。结果(1)TEM观察Mg NPs-Fe3O4作用于MCF-7后纳米颗粒均可通过内吞的方式进入细胞内发挥作用。三种粒径的Mg NPs-Fe3O4对MCF-7的增殖、凋亡和周期的影响呈浓度依赖性,但以9nm组的影响最为显著。谷胱甘肽含量检测和活性氧含量检测说明了Mg NPs-Fe3O4可对MCF-7细胞产生氧化损伤,Real-time PCR和Western Blot实验显示了HO-1、GCLC、GCLM基因和蛋白不同程度的表达上调。(2)20μg/m L Mg NPs-Fe3O4能有效增强EPI杀伤MCF-7/ADR的效率;与单独用药组相比,Mg NPs-Fe3O4联合EPI组的耐药基因ABCB1、ABCG2和耐药蛋白P-gp、BCRP表达下调。结论(1)Mg NPs-Fe3O4对MCF-7可通过产生氧化损伤影响细胞的增殖、凋亡和细胞周期的变化,对细胞产生一定的毒性影响,尤其以9nm的Mg NPs-Fe3O4最为显著。(2)Mg NPs-Fe3O4协同EPI可使耐药基因ABCB1、ABCG2和耐药蛋白P-gp、BCRP的表达下调,逆转乳腺癌耐药细胞对EPI的耐受,增强其化疗药物敏感度。