【摘 要】
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玉米(Zeamay L.)是世界三大粮食作物之一,在中国的播种面积较大,是我国近年来发展最快的主要粮食作物。N6-methyladenosine(6mA)是真核生物和原核生物中发现的最丰富的DNA修饰之一,与植物中的基因表达有关。6mA的潜在功能包括转录激活和沉默、跨代染色质调节和应激反应。相比于在玉米中被大量研究的5-methylcytosine(5mC),6mA在玉米中的研究并不多。在模式植物
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玉米(Zeamay L.)是世界三大粮食作物之一,在中国的播种面积较大,是我国近年来发展最快的主要粮食作物。N6-methyladenosine(6mA)是真核生物和原核生物中发现的最丰富的DNA修饰之一,与植物中的基因表达有关。6mA的潜在功能包括转录激活和沉默、跨代染色质调节和应激反应。相比于在玉米中被大量研究的5-methylcytosine(5mC),6mA在玉米中的研究并不多。在模式植物拟南芥和模式作物水稻中已经有了 6mA的相关报道,而在玉米中的DNA6mA甲基化功能还并不清楚。因此本研究以B73和Mo17为实验材料,分析了 B73和Mo17中DNA6mA修饰在高温胁迫下的变化,揭示DNA 6mA在玉米耐热性中的重要作用。获得的主要成果如下:1.对三叶期B73和Mo17进行42℃高温处理,随着时间的增加,B73叶片出现明显的萎蔫直至24h后完全萎蔫,而Mo17在24h只表现出不明显的叶片弯曲,表明Mo17相比于B73表现出更好的耐高温能力。2.42℃热处理后,对B73和Mo17 DNA进行点杂交和LC-MS/MS检测,结果表明B73和Mo176mA含量存在明显差异,相比于含量变化不大的B73,Mo17中DNA 6mA修饰含量增加了约2.5倍。3.通过高通量测序检测了玉米中的6mA修饰,18h热处理后,B73总peak数和对应基因数目分别增加了 2319.0和1390.3,Mo17分别增加了 4668.7和2192.7。同时,B73DNA中甲基化程度增加与降低的基因数分别为2470和3133,Mo17分别为2284和2713。B73 6mA高甲基化同时表达上调的基因数为290,低甲基化同时表达下调的基因数为343,Mo17分别为712和236。4.全基因组甲基化图谱显示B73和Mo17的10条染色体中有6mA位点的广泛分布。对6mA位点在基因上的分布情况进行分析,发现6mA位点集中在基因间区。保守motif分析6mA在玉米的不同亚种内是保守的。5.通过观察株高、百粒重等农艺性状以及测定光合速率等生理指标,对B73、Mo17及F1代杂交种进行对比,表明B73、Mo17及F1代杂交种在农艺性状及生理指标上存在差异。
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