【摘 要】
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目的: 探讨引起Waddles（Wdl）小鼠遗传性小脑性共济失调的分子机制。 方法: 正常（+/+）和杂合子（+/wdl）小鼠均购自美国突变小鼠群体资源库（JAX）,在美国田纳西大学健康科学中心动物房饲
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目的: 探讨引起Waddles（Wdl）小鼠遗传性小脑性共济失调的分子机制。 方法: 正常（+/+）和杂合子（+/wdl）小鼠均购自美国突变小鼠群体资源库（JAX）,在美国田纳西大学健康科学中心动物房饲养和繁殖。F2代为正常（+/+）、杂合子（+/Wdl）及Wdl（Wdl/Wdl）小鼠,我们采用成年（2-4）个月的Wdl小鼠30只和同等数量同胎生的正常小鼠进行运动试验以确认动物模型。我们应用高通量温度梯度毛细管电泳技术,对Wdl小鼠第4号染色体Wdl位点基因进行PCR及RT-PCR扩增和检查,并用基因测序和RT-PCR的方法来证实突变基因的存在。为了确定突变的Car8基因是否影响其转录和翻译,我们对从Wdl小鼠和正常小鼠提取的mRNA进行Northern杂交,使用亲和法提纯的家兔的CAR8蛋白多克隆抗体进行Western blot分析,应用免疫组化的方法研究Wdl小鼠CAR8蛋白是否缺乏。为了研究调节Car8基因及靶基因表达的分子机制,我们应用了基因芯片微点阵（Microarray）分析。 结果: 1.Wdl小鼠和正常同胎生小鼠运动功能分析,足迹分析观察到,Wdl小鼠步距宽,为共济失调步态。与同胎生的正常小鼠比较,前腿及后腿均步距宽度增加（P<0.05）,而大步行走及前后步距长度无明显异常。旋转试验Wdl小鼠表现差,在每一个转速下,能耐受的时间变短（P<0.05）。 2.我们发现Wdl小鼠的Car8基因中的第7个外显子扩增产物的分子量比
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