大鼠肝纤维化进程中肝组织ACE2、Ang(1-7)、Mas受体变化的实验研究

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目的:通过观察大鼠肝纤维化形成过程中血管紧张素转化酶2(ACE2)、血管紧张素(1-7)[Ang(1-7)]、 Mas受体、转化生长因子β1(TGF-β1)及结缔组织生长因子(CTGF)的动态变化,探讨ACE2-Ang(1-7)-Mas受体轴在肝纤维化形成过程中的作用机制。方法:成年雄性Wistar大鼠36只,随机取6只为正常对照组(N组),余30只给予40%CCl4制备肝纤维化模型(M组),首次按5ml/kg皮下注射,以后每次3ml/kg,每3天1次;每次给药均根据体重调整CCl4用量。分别在造模第15、30、45、60、75天随机处死6只,对各组大鼠肝组织进行HE及Masson染色观察其病理改变,ELISA检测肝组织Ang(1-7)的水平,Western blotting及Real-time PCR方法检测ACE2、Mas受体、TGF-β1、CTGF蛋白及其mRNA的表达。结果:(1)病理结果:随着造模时间的延长,模型组大鼠的肝纤维化程度逐渐加重,造模第75天肝内可见少量假小叶形成。(2) ELISA结果:与正常对照组比较,模型组各时间段Ang(1-7)含量均增高(P<0.01),并呈逐渐上升趋势,15、30、45、60天模型组相邻两组间比较差异均有统计学意义,但75天模型组与60天模型组比较差异无统计学意义。(3) ACE2mRNA及其蛋白的检测结果:与正常对照组比较,ACE2mRNA及其蛋白的表达均增多(P<0.01),相邻两组间比较差异亦均有统计学意义,但75天模型组较60天模型组ACE2mRNA及其蛋白的表达水平均有所下降(P<0.01)。(4)Mas受体mRNA及其蛋白的检测结果:与正常对照组比较,各个时间段模型组Mas受体mRNA及其蛋白的表达水平均增高(P<0.01),15、30、45、60天模型组相邻两组间比较差异均有统计学意义,但75天模型组与60天模型组比较差异无统计学意义。(5) TGF-β1mRNA及其蛋白的检测结果:随着肝纤维化进展,模型各组TGF-β1mRNA及其蛋白的表达水平较正常对照组均增高(P<0.01),并呈逐渐上升趋势,相邻两组间比较亦均有统计学意义。(6) CTGFmRNA及其蛋白的检测结果:随着肝纤维化进展,模型各组CTGFmRNA及其蛋白的表达水平较正常对照组均增高(P<0.01),并呈逐渐上升趋势,相邻两组间比较亦均有统计学意义。结论:肝纤维化形成前期,ACE2-Ang(1-7)-Mas受体轴对肝纤维化的保护作用可能是可能是机体的自我保护机制,后期该轴的保护机制减弱。随着肝纤维化进展,TGF-β1、CTGF的表达水平逐渐增高。
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