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为了研究不同程度温度胁迫条件下,不同耐热性冷季型草坪草品种抗氧化酶系统的逆境响应机制,本研究采用30℃、35℃两个轻度热胁迫和40℃、45℃两个重度热胁迫,对热力、大师、长征3个耐热性依次降低的草地早熟禾品种中抗氧化酶活性及同工酶谱的响应原理进行探究。结果表明,在轻度热胁迫条件下:(1)两个轻度高温胁迫下,3个草地早熟禾品种的SOD活性均显著升高,中耐热品种大师和低耐热品种长征的响应幅度大于耐热品种热力;不同胁迫时间之间,3个品种的SOD同工酶谱没有发生明显变化,热力的同工酶表达量低于大师和长征。(2)30℃/25℃温度条件使得热力和大师的POD活性显著高于处理前,长征的POD活性升高不显著;热力的POD活性胁迫处理前后均显著高于大师和长征。35℃/30℃胁迫处理20d内,热力和大师的POD活性较之处理前均显著升高,长征没有显著差异;热力在胁迫处理前后的POD活性均显著高于大师和长征。3个品种的POD同工酶表达量在30℃/25℃、35℃/30℃温度胁迫后均为增强表达;热力的POD同工酶表达量大于大师和长征;(3)热力的CAT活性在轻度胁迫条件下没有产生明显的胁迫响应,大师和长征的CAT活性显著降低。3个品种的CAT同工酶表达量减弱,最后消失;品种热力具有特异性CAT同工酶带C2(Rf=0.62),热力的同工酶表达量大于大师和长征。(4)30℃/25℃温度胁迫28d内3个品种的APX活性与处理前没有显著差异;35℃/30℃温度条件下,3个品种的APX活性在处理20d内均显著升高(与0d相比);热力的APX活性在两个轻度热胁迫前后均低于大师和长征。3个品种的APX同工酶谱对30℃/25℃的胁迫响应相似,主要表现为A3条带(Rf=0.25)表达量的减弱,A5(Rf=0.53)、A6(Rf=0.58)表达量的增强;35℃/30℃温度条件对3个品种的APX同工酶谱没有产生明显影响。两个轻度热胁迫下,热力的APX同工酶谱亮度总体小于大师和长征。(5)30℃/25℃和35℃/30℃温度胁迫条件下,3个草地早熟禾品种的GR活性均显著升高(与0d相比);热力的GR活性在胁迫前后均低于大师和长征。3个品种的GR同工酶表达总量在30℃/25温度胁迫后呈减弱的变化,在35℃/30℃温度胁迫下表达量增加;3个品种的GR酶谱之间没有明显差异。
在重度热胁迫条件下:(1)40℃/35℃处理使热力SOD活性先下降后升高,大师和长征先升高后下降再升高;3个品种的SOD同工酶在胁迫中期(1d-3d)表达量降低,第4d增加;热力和大师的同工酶表达量大于长征。45℃/40℃温度条件下,3个品种的SOD活性均显著升高,品种间差异不显著;同工酶谱变化不明显,种间差异亦差异不明显。(2)40℃/35℃使3个品种POD活性在第1d显著升高,第2-4d下降;品种热力的POD活性除在第1d外,其它时间均显著高于大师和长征。3个品种的POD同工酶表达量总体表现为减弱的变化趋势,热力在整个高温胁迫中的主要POD同工酶条带(P8-P10)表达量大于大师和长征。大师和长征的POD活性对45℃/40℃温度胁迫响应不明显,热力则表现为先下降后升高的响应模式;热力的POD活性在胁迫前后均高于大师和长征。3个品种的POD同工酶表达量在45℃/40℃胁迫下变化不明显。品种热力的POD同工酶表达量总体大于大师和长征。(3)40℃/35℃温度胁迫4d内大师的CAT活性显著高于处理前(0d),热力和长征的CAT活性胁迫前后没有发生显著差异;45℃/40℃温度处理使得3个草地早熟禾品种的CAT活性均显著低于处理前(0d),长征的下降幅度大于热力和大师。40℃/35℃温度胁迫后,3个草地早熟禾品种的CAT谱带表达增强,热力的CAT同工酶表达量大于大师和长征。45℃/40℃温度胁迫对3个草地早熟禾的CAT同工酶表达量没有明显影响,热力的CAT同工酶表达量大于大师和长征。(4)3个草地早熟禾品种的APX活性在40℃/35℃温度胁迫下均呈现先逐渐升高后迅速下降的变化趋势,胁迫4d内热力的APX活性显著升高,大师和长征没有明显变化。45℃/40℃温度胁迫下,热力的APX活性表现为先升高后下降再升高的趋势,而大师和长征则表现为先下降后升高再下降;45℃/40℃温度胁迫2d内3个品种的APX活性均没有发生显著变化。40℃/35℃和45℃/40℃温度胁迫均使得品种热力的APX同工酶表达量增加,大师和长征没有明显变化;热力的APX同工酶表达量大于大师和长征,且具有特异性条带A5表达。(5)40℃/35℃温度胁迫4d内3个品种的GR活性均显著高于处理前(0d);3个品种在该温度下的胁迫响应变化基本一致,没有明显的品种差异。45℃/40℃温度胁迫2d内均使得3个品种的GR活性显著低于处理前,且大师的GR活性显著高于热力和长征。40℃/35℃温度胁迫使得3个草地早熟禾品种的GR同工酶表达量明显下降,3个品种之间的酶谱表达没有明显差异;45℃/40℃温度胁迫1d内,3个品种的GR同工酶表达量增加,1d后明显减弱;大师的同工酶表达量明显高于热力和长征。