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喉癌是比较常见的恶性肿瘤,严重影响患者的功能和生存,在中国北方地区高发.近年来,喉癌和其他头颈部肿瘤的生存率徘徊不前.在诊断、预防、和治疗方面的进步有赖于在导致喉癌的复杂的致瘤机制上获得令人信服的解释.尽管有些对几个己知的癌基因和致癌基因与喉癌关系的研究,但对与肿瘤相关的染色体和基因水平上的变化至今没有系统地进行.比较基因组杂交是一个重要的技术进步,它可以在一次实验中对全基因组各部分DNA序列拷贝数进行分析、筛查.比较基因组杂交技术已经应用在许多实体瘤包括头颈部鳞癌的遗传学变化的研究方面.该研究将采用比较基因组杂交、结合临床与病理资料分析,探索相关染色体改变与喉癌的关系.方法:利用比较基因组杂交技术并结合临床病理学资料对33例喉鳞状细胞癌的染色体改变进行研究.根据比较基因组杂交提示的染色体畸变结果,应用差异PCR、RT-PCR、免疫组化技术,针对11q13及其所包含的CCND1和EMS1基因进行DNA水平、mRNA水平和蛋白质水平的研究.结果:33例肿瘤染色体样本共有189个扩增和163个缺失,平均每例患者分别为5.7个扩增和4.9处缺失.数据表明,染色体DNA非随机拷贝数的改变是扩增多于缺失.经常的扩增有:3q(23/33),8q(16/33),11q13(13/33),5p(11/33),2q(8/33),12p(8/33),13q(8/33),9p(7/33).高水平扩增包括3q,5p,8q,11q13 and 12p.缺失有1p32-ter(24/33),3p(12/33),9q(10/33),17p(10/33),19(10/33),9q(10/33),20(9/33),2q(9/33),20(9/33),5q(5/33)and 4p(5/33).在发生3号染色体短臂缺失的10例患者中同时存在整个3号染色体长臂或者部分的扩增.9例CCND1基因扩增(27﹪,9/33),其中6例发生在13例¨q13扩增病例中(46﹪,6/13).EMS1基因扩增发生在8个病例中,其中7例发生在13例11q13扩增病例中(54﹪,7/13).有5例发生CCND1和EMS1基因的共扩增,均属¨q13扩增病例.CCND1基因扩增导致了cyclin D1在mRNA和蛋白质水平上的过表达,33例中有7例在mRNA水平上过表达,10例在蛋白质水平上的过表达.结论:研究结果表明喉癌的基因组发生了一系列变化,特别是3q,5q,8q的扩增;1p32-ter的缺失是喉癌的特征性改变.数据表明,CCND1基因可能是¨q13扩增中的一个重要的靶基因.这些结果为喉癌潜在可能的癌基因和抑癌基因提供了候选区域,针对这些候选区域应该进行进一步的分子生物学研究.