四川康砖茶渥堆过程中菌群与氟含量分析及优势微生物鉴定

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四川康砖茶从属于四川南路边茶,是中国特有的茶叶种类,是上千年来藏族人们的生活必需品,具有厚重的历史内涵和文化底蕴。然而,许多康砖茶产品的氟含量较高,长期饮用已经在藏族地区造成了慢性“氟中毒”。目前化学降氟的文献已有很多,康砖茶自身微生物降氟却鲜有报道。本论文以四川康砖茶为研究对象,对其品质形成的关键工艺——渥堆生产过程中菌群及氟含量情况进行分析,并筛选优势菌种进行鉴定,以期为微生物降氟研究提供参考。实验结果表明:1.四川康砖茶渥堆过程中微生物数量与氟含量的相关性四川康砖茶整个渥堆过程中细菌数量和霉菌数量在渥堆初期变化不明显,从渥堆中期开始增长并达到高峰期(>107CFU/g),渥堆后期明显下降;样品渥堆过程中氟含量为749.39-780.12mg/kg,均超过国家标准规定的最高限量300mg/kg,与细菌数量,霉菌和酵母数量不存在显著相关性,说明茶叶渥堆过程中的自身微生物降氟能力很弱。2.优势菌鉴定情况如下:(1)根据四川康砖茶渥堆过程中分离的细菌菌落特征,结合个体形态特征,挑取优势菌株通过16S rDNA序列分析,鉴定出四川康砖茶渥堆过程中主要优势细菌,其中形态学特征:①菌体为杆状,菌落乳白色,圆形、扁平,中等或小,表面光滑,不透明,革兰氏染色阳性,有芽孢,鉴定为芽孢杆菌(Bacillus sp.)(基因登录号为:1534570);②球状,菌落呈淡色,圆形、扁平,中等,表面光滑,不透明,革兰氏染色阳性,鉴定为葡萄球菌(Staphylococcus sp.)(基因登录号为:1534575)(2)根据四川康砖茶渥堆过程中分离的真菌菌落特征,结合个体形态特征,挑取优势菌株通过ITS序列分析,鉴定出四川康砖茶渥堆过程中主要优势真菌,其中形态学特征:①菌落平坦,较大,卵圆或椭圆,表面呈黑色,菌落反面呈褐色,质地为丝绒状,菌丝有隔膜、分生孢子梗无隔,有足细胞、顶囊呈圆形、一排小梗,分生孢子圆形或椭圆形等,鉴定为黑曲霉(Aspergillus niger)(基因登录号为:1534309);②菌落圆形或椭圆,较小,呈青绿色,质地为毯状,菌落背面为绿色,有“帚状分支”、分生孢子呈串状排列,圆形等,鉴定为青霉(Penicillium sp.)(基因登录号为:1534307);③菌落圆形或椭圆,较大,质地为毯状,灰绿色,蓬松,背面呈橙褐色,孢子褐绿色,菌丝分隔,顶囊多核,分生孢子梗呈辐射状,烟曲霉(Aspergillus fumiqatus)(基因登录号为:1534305);④菌落圆形,边缘整齐,奶白色,不透明,光滑、湿润,芽殖,产生卵圆形的子囊孢子,鉴定为汉逊德巴利酵母(Debaryomyces Hansenii)(基因登录号为:1534287);⑤菌落圆形,边缘整齐,乳白色,不透明,芽殖,有假菌丝,无子囊孢子,鉴定为假丝酵母(Candida sp.)(基因登录号为:1534278)。
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