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本工作将毛细管电泳一电化学检测技术引入免疫分析中,将辣根过氧化物酶(HRP)催化过氧化氢(H<,2>O<,2>)氧化邻氨基酚的酶促反应与其氧化产物的电极还原相偶合,利用毛细管电泳电化学检测技术间接检测邻氨基酚-H<,2>O<,2>-辣根过氧化物酶(HRP)体系中的HRP含量。用此方法检测人血清甲胎蛋白(AFP)、癌胚抗原(CEA)、前列腺特异性抗原(PSA)、人绒毛膜促性腺激素(HCG)、血清总甲状腺素(T4),并同时检测了血样中的PSA、HCG、CEA。全文共分为八章。
第一章为绪论,介绍了毛细管电泳酶联免疫分析的发展和研究现状以及本课题的意义,第二章介绍了毛细管电泳电化学间接检测HRP的情况,第三到第七章分别为AFP,CEA,PSA,HCG,T4的检测,第八章为同时检测CEA,PSA,HCG。
在最佳反应条件下,测定游离HRP检测限为1.09×10<-12> mol/mL(S/N=3),线性范围为2.3×10<-12>~3.5×10<-15>mol/mL。
利用此方法成功应用于检测人血清甲胎蛋白,灵敏度高于经典ELISA法。测定线性范围为1.5~66.6 ng/mL,检测限为0.48 ng/mL(S/N=3)。用所建立的方法对人血清样品进行了测定,并与现行的ELISA法进行对照,二者相关性很好。
利用此方法成功应用于检测癌胚抗原,灵敏度高于经典ELISA法。测定线性范围为1.6~69.0 ng/mL,检测限为0.17 ng/mL(S/N=3)。用所建立的方法对人血清样品进行了测定,并与现行的ELISA法进行对照,二者相关性很好。
利用此方法成功应用于检测前列腺特异性抗原,灵敏度高于经典ELISA法。测定线性范围为2.1~80.2 ng/mL,检测限为0.22 ng/mL(S/N=3)。用所建立的方法对人血清样品进行了测定,并与现行的ELISA法进行对照,二者相关性很好。
利用此方法成功应用于检测人绒毛膜促性腺激素,灵敏度高于经典ELISA法。测定线性范围为1.7~132.5 ng/mL,检测限为0.30 ng/mL(S/N=3)。用所建立的方法对人血清样品进行了测定,并与现行的ELISA法进行对照,二者相关性很好。
利用此方法成功应用于检测总甲状腺素。灵敏度高于经典ELISA法。测定线性范围为1.7~260.0 ng/mL,检测限为1.0 ng/mL(S/N=3)。用所建立的方法对人血清样品进行了测定,并与现行的ELISA法进行对照,二者相关性很好。
利用此方法应用于同时检测CEA,PSA,HCG,成功实现了同时进行多种免疫体系的分离检测。