双小泛素样蛋白的化学合成、结构解析及其与结合蛋白的交联分析

来源 :中国科学技术大学 | 被引量 : 0次 | 上传用户:liteary
下载到本地 , 更方便阅读
声明 : 本文档内容版权归属内容提供方 , 如果您对本文有版权争议 , 可与客服联系进行内容授权或下架
论文部分内容阅读
蛋白质在生命过程中发挥着重要的生理功能。翻译后修饰(酰基化、磷酸化、泛素化等)使得蛋白质具有更加复杂多变的功能。为了对其开展生物物理方面的研究,需要获取足够量的、性质均一的样品。生物提取和重组表达的方法在获取一些功能蛋白尤其是翻译后修饰蛋白及环形蛋白的过程中都存在着些许的局限。虽然非天然氨基酸嵌入技术的发展解决了一些关键问题,但是可嵌入非天然氨基酸数量的限制、位点的限制和产率低的限制使得该方法也具有一定的局限性。蛋白质化学合成技术能够在原子尺度上对蛋白质进行设计合成,是获取一些重要功能蛋白的有效手段。经过几十年的发展,蛋白质化学合成已经发生了质的变化。Merrifield教授发展的固相多肽合成技术简化了操作步骤,提高了合成效率。Kent教授发展的自然化学连接方法使得人们对于更长和更复杂蛋白质的获取成为可能。包括辅基和多肽酰肼在内的各种方法的发展拓宽了蛋白质化学合成获取蛋白的应用范围。从最初的几个氨基酸小肽的合成到如今各种复杂的转录翻译后修饰蛋白的合成,蛋白质化学合成已经成为化学生物学研究中的有力工具。本论文中,我们使用蛋白质化学合成方法合成了多种功能蛋白,并对这些蛋白的生物化学及生物物理学性质进行了初步研究。论文由四个章节组成。第一章简要介绍了蛋白质化学合成的发展,主要包括早期的蛋白质化学合成历史、固相多肽合成技术、肽片段连接技术以及基于这些技术的蛋白质化学合成应用。第二章介绍了基于多肽酰肼和辅基连接策略的天然Di-SUMO2蛋白的化学合成及生化结构研究。首先我们介绍了天然Di-SUMO2蛋白的合成方法。在获得Di-SUMO2蛋白后,通过与linear Di-SUMO2蛋白在二级结构和蛋白-蛋白相互作用中的对比,确定了合成Di-SUMO2蛋白具有和表达蛋白相似的生化性质。最后我们利用准外消旋结晶方法,尝试了不同截短体Di-SUMO2三维结构的获取,并初步获得了晶体。第三章介绍了 Di-SUMO2光交联探针的化学合成及其在SUMO-SIM相互作用之间的研究。我们首先化学全合成了含有二苯甲酮光交联分子的Di-SUMO2探针,并与已知的SUMO链相互作用蛋白RNF4和RNF111进行了交联验证实验。在这个过程中,我们也进行了复杂体系下和竞争性体系下的交联验证实验。最后,我们利用探针在HeLa细胞裂解液中交联出了多个相互作用蛋白。第四章介绍了药用利那洛肽的化学合成及其结构的获取。我们首先化学全合成了 L型和D型利那洛肽,并通过外消旋结晶实验获取了利那洛肽的晶体结构。根据结构信息,我们获悉了利那洛肽通过分子内三对二硫键来形成一个紧实的、含有三个β-转角的空间结构。
其他文献
在全球经济持续低迷的大环境下,企业通过构建供应链金融平台,可盘活存货、预付账款和应收账款等流动资产资源,成功化解缺乏抵押资源的难题。本文从构建供应链金融平台出发,初步介
人力资源管理信息系统能够降低企业人力资源管理工作中大量的重复性工作,提高人力资源管理工作的准确性和及时性,能够实时动态的准确完整的提供人力资源信息,帮助企业决策者和管
随着乡村振兴战略的实施,美丽乡村建设成了这一战略的重要抓手。杨陵区按照幸福乡村、美丽乡村、清洁乡村三个层次,努力打造"一村一景一特色"的美丽乡村,为新时期乡村振兴探
本文对蒙药多枝柳穿鱼的性状、显微特征等进行了鉴别,为正确使用该药材提供了依据。
<正>(节选)菜地是与人类健康密切相关的一种土地利用方式,菜地土壤基本性质与重金属含量的变化能在一定程度上反映出菜地土壤物质的输入与迁移状况[1]。目前,菜地土壤性质变
会议
利用外资对我国企业的发展起着积极的促进作用,但合资过程中也存在一定风险。一些外商采取不同手段压制中国品牌的发展,挤压中国产品的市场,转移合资企业的利润,减少中方股权份额
文章介绍了机构仓储的概念和建设机构仓储的意义等,提出了一个构建高校机构仓储平台的规划,该规划包括前期准备、功能规划以及模块设计。文章还提出了规划实现过程中应注意的
通过对柳穿鱼药材性状、显微特征及理化鉴别的分析研究,找到了鉴别特征,为该药材的使用和进一步研究提供了鉴定依据.
一词多义是二语习得中的一大难点,给二语习得者造成了极大的困惑。本文根据概念整合理论探讨一词多义结构及扩展理据,尝试构建一词多义的认知模型,充分应用到德语教学实践中
如何听课和评课,长期以来是中小学音乐教师一个研究和学习的课题,不同的阅历和心态,会直接影响听课者的认识和评价。中小学音乐课标研制组长、首都师范大学博士生导师、音乐