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目的：从钙代谢角度出发，研究肾虚骨质疏松症大鼠肠粘膜中钙结合蛋白CaBP-D9k及维生素1，25（OH）2D3受体的mRNA和蛋白表达及丝裂原活化蛋白激酶（MAPK）中ERK1／ERK2的蛋白表达，揭示肾虚骨质疏松症的发病机制，阐明纳米钙补肾中药防治肾虚骨质疏松症有效，为提高中医基础理论学术水平提供依据。 材料与方法：实验部分采用切除大鼠双侧卵巢的方法复制肾虚骨质疏松症模型，采用纳米钙组及具有益肾填精、补钙壮骨作用的纳米钙补肾中药（大、中、小）剂量对实验大鼠治疗12周（应用反证的治法），同时用骨疏康颗粒剂、雌二醇（E2）及钙尔奇D600作为阳性对照组，正常大鼠和模型空白组为空白对照组；用双能X线骨密度仪检测离体骨密度，用生化方法对血清中（动、静脉）钙、镁、抗酒石酸性酸性磷酸酶和骨钙素等指标进行检测；用PCR法、Western印迹法检测肾虚骨质疏松症大鼠肠粘膜中CaBP-D9k及维生素1，25（OH）2D3受体的mRNA和蛋白表达及ERK1／ERK2的蛋白表达。 结果：[1]实验动物子宫指数比较：与模型空白组比较，纳米钙补肾中药各剂量组、纳米钙组、雌二醇E2组及骨疏康组虽有所升高，其中雌二醇E2组有较大升高，但均无显著性差异。[2]实验动物股骨及股骨头骨密度BMD结果显示：给药12周后，各用药组（纳米钙补肾中药各剂量组、纳米钙组、骨疏康组、雌二醇E2组及钙尔奇D组）均可明显增加股骨、股骨头的骨密度值。其中股骨的骨密度提示：纳米钙组能达到正常大鼠的骨密度值，其效果最优；纳米钙补肾中药各组能提高去卵巢实验大鼠股骨的骨密度值，其效果与钙尔奇D600和雌二醇类似，优于骨疏康组。股骨头的骨密度提示：纳米钙补肾中药（大剂量）组和纳米钙补肾中药（小剂量）组能达到正常大鼠的骨密度值：实验组与阳性对照组效果相似，但都优于骨疏康组。[3]血清骨代谢生化指标血清抗酒石酸酸性磷酸酶（TRAP）含量检测结果显示：与模型空白组比较，纳米钙补肾中药（中剂量）组、雌二醇E2组有显著性差异，其余各组有非常显著性差异；与正常组比较有显著性差异，各治疗组间无显著性差异。提示：大鼠去卵巢后，模空组血清TRAP含量明显高于其它各组；治疗组和阳性药物对照组均能显著降低去卵巢大鼠TRAP值，但仍未达到正常组水平。[4]血清骨代谢生化指标血清骨钙素含量检测提示：大鼠去卵巢后，模空组骨钙素含量明显低于正常组；用药后，虽然能够提高骨钙素含量值，但与模空组比较仍无显著差异。[5]血清钙含量检测结果提示：大鼠去卵巢后，模空组血清钙含量显著低于正常组；各实验组均能显著提高去卵巢实验大鼠血清的钙含量，并且达到与正常组钙值无显著差异。而且各实验组均优于实验对照药组。血清镁含量检测结果提示：大鼠去卵巢后，模空组血清镁含量低于正常组，但差异不显著；各实验组均能提高去卵巢实验大鼠血清镁的含量，数值基本都高于模空组，但只有纳米钙组和纳米钙补肾中药（大剂量）组达到与正常组无显著差异的水平。纳米钙组与雌二醇E2组作用相似，优于钙尔奇D600组，但不及骨疏康组，骨疏康组对血清镁的作用最强。[6]对门静脉血钙含量的测定结果显示：大鼠去卵巢后，模空组门静脉钙含量低于正常组，但差异不显著；而纳米钙组、纳米钙补肾中药（大、中、小）剂量组及钙尔奇D600组门静脉血清钙与模空组比较有明显增高；且上述各组门 辽宁中医学院博士学位论文Doetorate PaPerofLiaoningCollegeofTraditionalChineseMedieine静脉血清钙明显达到并高于正常组;进一步与雌二醇E:及骨疏康对照组相比较，上述各组门静脉血清钙也有明显高于正常组趋势。对门静脉血镁含量的测定结果显示:与正常组比较，骨疏康组门静脉血清镁有明显增高;与模空组比较，纳米钙补肾中药（大剂量）的门静脉血清镁有明显增高;与骨疏康组比较，所有各组门静脉血清镁均有明显增高。「7j大鼠肠粘膜组织可检测到丝裂原活化蛋白激酶（MAPK）中ERK，/ERKZ的蛋白表达，采用Western blot分析其表达及显影胶片扫描的吸光度值，与正常组比较，模型空白组的表达增强;纳米钙组、纳米钙补肾中药各剂量组用药后12周，与模型空白组比较，均可明显下调ERK:及ERKZ蛋白表达水平。「8」RT一PCR及Western方法检测，正常大鼠肠粘膜中含有Ca即一Dgk、维生素1，25（0H）2D3受体mRNA和蛋白表达;模型空白组大鼠肠粘膜组织中的mRNA和蛋白表达水平有明显的下调。纳米钙、纳米钙补肾中药各剂量组、钙尔奇D600组、骨疏康和雌二醇EZ组用药后12周，与模型空白组比较，可不同程度上调肠粘膜组织中的mRNA和蛋白表达水平。但其中各治疗用药组的效果有所不同，一般表现为纳米钙补l肾中药剂量组作用较好。 结论:【1〕切除大鼠双侧卵巢方法可以成功复制肾虚骨质疏松症模型。仁2」正常大鼠肠粘膜组织可以在基因、蛋白水平表达钙结合蛋白CaBP一Dgk、维生素1，25（OH） 2D3受体，且存在信号转导MAPK通路中的ERK途径，表明其可能在肠钙吸收中起重要作用。〔3]大鼠肾虚骨质疏松症的发生，与肠粘膜组织中钙结合蛋白caBP一Dgk、维生素1，25（oH） 2D3受体mRNA和蛋白表达的变化有关，从而影响肠钙的吸收。〔4〕大鼠肾虚骨质疏松症的发生与M