论文部分内容阅读
为明确树舌灵芝中小分子有机化合物的组成与功效,本论文对其化学成分及抗肿瘤活性进行了研究。 采用溶剂提取法提取树舌灵芝中小分子有机化合物。将树舌灵芝烘干(40℃烘干箱中),粉碎后,放入不锈钢带盖桶中,用石油醚室温下浸泡24h,不断搅拌,吸取上清液,反复提取,合并提取液,在40℃条件下减压浓缩,得石油醚层提取浓缩液。剩余树舌灵芝粗粉挥尽石油醚后再用95%乙醇室温条件下浸泡,方法同上。得乙醇浸膏,再依次用乙醚、氯仿、乙酸乙酯和正丁醇萃取,得到乙醚浸膏、氯仿浸膏、乙酸乙酯浸膏和正丁醇浸膏。采用系统溶剂分离法、两相溶剂萃取法、层析法、结晶法和重结晶法等多种方法和不同的分离工艺路线,对树舌灵芝乙醇浸膏、石油醚层和氯仿层样品进行逐级分离纯化,得到一种水溶性结晶——晶体Ⅰ和4种脂溶性结晶——晶体Ⅱ、Ⅲ、Ⅳ和Ⅴ,以及一个挥发性部分——氯仿层组分Ⅰ石油醚相。利用高效液相色谱在适当条件下对晶体Ⅰ进行进一步分离和纯化,分别得到3种化合物:化合物L、M和N。采用分步结晶法及重结晶法对晶体Ⅱ进行进一步分离和纯化得到6个晶体——晶体A-F。 对结晶进行结构鉴定,经核磁共振谱、质谱、高效液相色谱、薄层色谱等分析鉴定方法并结合标准图谱对照,鉴定化合物L为甘露醇,化合物N为(+)-海藻糖,晶体F为麦角甾烷-7,22-二烯-3β-醇。 通过GC-MS分析了晶体Ⅲ、晶体D、晶体E和氯仿层组分Ⅰ石油醚相的化学成分。结果表明晶体Ⅲ主要含有(3β,5α,22E)麦角甾烷-14,22-二烯-3-醇和3β-甲氧甲氧基-4-烯-胆甾烷。晶体D主要含有麦角甾醇和(3β,5α,22E)麦角甾烷-14,22-二烯-3-醇。晶体E主要含有1,2-邻苯二甲酸二异辛酯、二十(碳)烷、2-甲基-2-乙基-十三烷醇、2,6,10,14-四甲基.十六(碳)烷和3β,5α,22E-麦角甾烷-7,22-二烯-3-醇。氯仿浸膏组分Ⅰ石油醚相主要含有3,7,11-三甲基-1-月桂醇、戊二酸二丁酯、己二酸双异丁酯、14-甲基-十五烷酸甲酯、8,11-十八碳二烯酸甲酯、9-十八碳烯酸甲酯和亚油酸乙酯。其中除麦角甾醇、3β,5α,22E-麦角甾烷-7,22-二烯-3-醇外,其余成分为首次从树舌灵芝中分离得到。 本文采用MTT法初步研究了乙醇提取物、乙醚提取物、乙酸乙酯提取物、氯仿提取物和石油醚提取物对人乳癌MCF-7细胞的存活率的影响,结果表明氯仿提取物对MCF-7细胞有较强的抑制作用,而其余各层样品抑制作用不明显。为树舌灵芝化学成分的深入药理作用的研究奠定了基础。