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目的:移植排斥反应是器官移植术后主要的并发症之一,即使供者与受者配型成功,移植排斥仍然无法避免。它会在移植手术后的数分钟至数年发生。其反应过程主要与T淋巴细胞相关,随着对移植排斥免疫过程研究的不断深入,后来又发现CD4T淋巴细胞、CD8T淋巴细胞、白细胞介素17,转化生长因子β1等诸多参与移植排斥反应的细胞因子,目前大多数研究都是围绕这些细胞因子展开。常用的抗移植排斥药物有环孢素类、硫唑嘌呤、大环内酯类抗生素、以及免疫球蛋白类等。本文讨论的药物蜈蚣三七为毛莨科银莲花属林荫银莲花(Anemone flaccida Fr.Schmidt)。试验通过制造移植排斥模型,用以观察蜈蚣三七总皂苷对移植排斥的作用,分析小鼠血清中巨噬细胞移动抑制因子与其关系,为蜈蚣三七的新作用研究奠定基础。
方法:由于皮肤移植手术简便易行,方法可靠,本试验选择皮肤移植用以验证抗免疫排斥作用。选取健康KM小鼠60只,按体重随机分为6组,手术切除受体皮肤形成创面,进行供体皮肤移植,假手术组、模型组小鼠给予蒸馏水;蜈蚣三七总皂苷低、中、高剂量组分别按10、20、40mg·kg-1灌胃给药,阳性对照组按20 mg·kg-1灌胃给药。造模后第1天起,按方案继续给药,每天1次。分别观察皮肤平均存活时间,检测小鼠血清中巨噬细胞移动抑制因子含量,皮肤组织病理学形态。
结果:通过观察皮肤平均存活时间蜈蚣三七总皂苷低、中、高剂量组与模型组相比较有着显著的差异(P<0.05),给药组数据说明了蜈蚣三七总皂苷能够有效延长皮肤移植皮片存活时间。通过检测小鼠血清中巨噬细胞移动抑制因子含量蜈蚣三七总皂苷中、高剂量组与模型组相比较有着显著的差异(P<0.05),可见蜈蚣三七总皂苷可以有效抑制小鼠血清中巨噬细胞移动抑制因子含量。光镜下观察,可见模型组中移植皮片中有弥漫淋巴细胞浸润,皮下组织结构不清,腺体及毛细血管破坏严重,提示发生急性排斥反应;蜈蚣三七总皂苷低、中、高剂量组和环孢素组的移植皮片中有少量中性粒细胞浸润,毛囊、血管及皮下脂肪组织结构完整,可见移植皮肤存活。说明蜈蚣三七总皂苷能够有效的抑制移植排斥反应的发生,有效的提高皮片存活能力。
结论:试验表明,蜈蚣三七总皂苷可使移植皮片的存活率明显提高,平均存活时间延长;病理损害较模型组明显减轻,急性排斥反应较轻。表明蜈蚣三七总皂苷能够减轻排斥反应对移植皮肤的免疫损伤,有抑制急性排斥反应的作用。