【摘 要】
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长链非编码RNA（long non-coding RNA,lncRNA）在肿瘤的进展中具有重要作用,本研究通过检测甲状腺乳头状癌（Papillary thyroid carcinoma,PTC）患者组织中lncRNA ABHD11-AS1表达以及体外功能试验和机制实验,分析lncRNA ABHD11-AS1在PTC进展中的作用,并进一步探讨其在PTC的作用机制。在本研究,我们收集98例PTC患者癌
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长链非编码RNA（long non-coding RNA,lncRNA）在肿瘤的进展中具有重要作用,本研究通过检测甲状腺乳头状癌（Papillary thyroid carcinoma,PTC）患者组织中lncRNA ABHD11-AS1表达以及体外功能试验和机制实验,分析lncRNA ABHD11-AS1在PTC进展中的作用,并进一步探讨其在PTC的作用机制。在本研究,我们收集98例PTC患者癌组织及其癌旁组织,以癌旁组织作为对照组,采用qRT-PCR法检测lncRNA ABHD11-AS1在PTC组织中的表达情况,结果显示lncRNA ABHD11-AS1在PTC组织中的表达明显高于癌旁组织。接着我们采用卡方检验分析lncRNA ABHD11-AS1对PTC患者预后的影响,结果显示lncRNA ABHD11-AS1的高表达与PTC患者淋巴结转移相关。为了进一步探索lncRNA ABHD11-AS1在PTC发生、发展中的作用,我们选择了TPC-1和KTC-1两种PTC细胞株转染了pc RNA3.1-ABHD11-AS1或si-ABHD11-AS1,以pcDNA3.1或si-NC作为对照组,进行transwell,MTT等体外功能实验,结果证明抑制lncRNA ABHD11-AS1的表达能够减弱PTC细胞的侵袭、迁移和细胞增殖能力,与以上结果一致的是过表达lncRNA ABHD11-AS1能够明显促进PTC细胞的侵袭、迁移和细胞增殖能力。在本研究中,为了探讨lncRNA ABHD11-AS1在PTC中发挥作用的分子机制,我们通过RNA pull down和测序分析找到了lncRNA ABHD11-AS1下游miR-29a并通过两个在线生物信息学数据库（Targetscan、miRanda）进行功能富集分析预测筛选出了miR-29a的下游靶基因EPS15L1。首先我们对98例PTC患者组织及其癌旁组织进行了qRT-PCR实验检测miR-29a在PTC中的表达情况,结果发现miR-29a在PTC高表达。通过对TPC-1和KTC-1两株细胞转染miR-29a mimics或miR-29a inhibitor,以mimics-NC或inhibitor-NC作为对照组,进行transwell和MTT等体外功能实验,结果证明miR-29a过表达能够促进PTC细胞的侵袭、迁移和增殖能力,同时抑制miR-29a的表达能够明显抑制PTC细胞的侵袭、迁移和增殖能力。并且通过qRTPCR实验发现过表达lncRNA ABHD11-AS1后miR-29a的表达也出现了明显的上调,抑制lncRNA ABHD11-AS1表达后miR-29a的表达明显下调,即lncRNA ABHD11-AS1可能通过正向调控miR-29a来促进PTC的进展。最后,为了探讨EPS15L1是否受到miR-29a和lncRNA ABHD11-AS1的调节,我们应用了qRT-PCR和Western blot实验验证。结果显示miR-29a过表达能够明显促进EPS15L1蛋白水平和基因水平的表达,抑制miR-29a的表达后EPS15L1基因水平和蛋白水平的表达也出现明显下调。与以上结果一致的是,过表达lncRNA ABHD11-AS1后,EPS15L1基因水平和蛋白水平的表达也同时上调,抑制lncRNA ABHD11-AS1表达,EPS15L1基因水平和蛋白水平明显下降。综上,实验结果提示EPS15L1是miR-29a在PTC中的下游靶点,PTC中lncRNA ABHD11-AS1的表达与miR-29a呈正相关。因此,我们有理由相信lncRNA ABHD11-AS1通过miR-29a/EPS15L1轴促进PTC的进展,这为PTC的诊断和治疗策略提供了新的视角。
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