用于蛋白质检测的复合纳米粒子的构建

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蛋白质在生物研究、临床诊断等方面具有重大意义。近年来,均相检测方法由于检测灵敏、操作简便等优势,引起了广泛关注。本文结合聚合物辅助信号放大、纳米技术与蛋白质均相检测技术,设计了基于竞争性识别的复合纳米粒子传感体系:1.通过点击(click)化学与偶联反应制备了具有芳基磺酰胺末端的大分子链转移试剂,并通过可逆加成-断裂链转移(RAFT)聚合制备了聚合物巯基封端的芳基磺酰胺标记的聚乙二醇-嵌-聚丙烯酸(SABA-PEG4000-b-PAAn-SH),其中聚丙烯酸片段在水溶液中呈电负性。同时通过RAFT聚合制备了具有还原性的均聚物巯基封端的聚维生素C丙烯酸酯(HS-PAAAn)。测试表明聚合物D<1.4,表明聚合活性可控。巯基末端为聚合物修饰金纳米粒子提供可能性。2.通过非均相油-水分层方法制备树枝状介孔二氧化硅球(MSNs),表征证明其具有良好尺寸分布与负载性能,实验中用于负载显色分子Cu2+,并对其负载量进行分析。通过氨基化使MSNs表面带有正电荷。巯基封端的聚合物通过Au-S配位作用修饰金纳米粒子,形成聚合物接枝的金纳米粒子。带负电荷的聚合物接枝金纳米粒子通过静电作用吸附在氨基化介孔二氧化硅球表面,调节二者比例,实现对显色分子Cu2+的有效包封,构建用于蛋白质检测的复合纳米粒子检测体系。
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