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【目的】检测Tim-3和Gal-9在小鼠自然流产模型和正常妊娠模型母胎界面的表达，探讨Tim-3-Gal-9通路与不明原因复发性自然流产的联系。【方法】1.将CBA/J雌鼠分别与DBA/2、BALB/c雄鼠2：1合笼，分别构建小鼠自然流产模型和正常妊娠模型。2.采用Westernblot、Real-TimePCR和流式细胞术检测小鼠自然流产模型和正常妊娠模型胎盘组织Tim-3和Gal-9的表达。3.采用免疫组织化学、Westernblot、Real-TimePCR和流式细胞术检测小鼠自然流产模型和正常妊娠模型蜕膜组织Tim-3和Gal-9的表达。【结果】1.小鼠自然流产模型和正常妊娠模型造模成功。2.小鼠自然流产模型胎盘组织中Tim-3蛋白和mRNA的表达高于正常妊娠模型，且差异有统计学意义（P<0.05）。3.小鼠自然流产模型的滋养细胞Tim-3+细胞百分比高于正常妊娠模型，差异有统计学意义（P<0.05）。4.Tim-3在小鼠自然流产模型和正常妊娠模型蜕膜组织中均有表达，且主要表达在细胞胞浆和细胞膜，小鼠自然流产模型蜕膜组织Tim-3蛋白表达水平高于正常妊娠模型，差异有统计学意义（P<0.05）；而两组模型蜕膜组织Tim-3mRNA表达水平差异无统计学差异（P>0.05）。5.①小鼠自然流产模型和正常妊娠模型的蜕膜基质细胞Tim-3+细胞百分比差异无统计学意义（P>0.05）。②小鼠自然流产模型的蜕膜腺上皮细胞Tim-3+细胞百分比高于小鼠正常妊娠模型，差异有统计学意义（P<0.05）。③小鼠自然流产模型的蜕膜淋巴细胞Tim-3+细胞百分比低于小鼠正常妊娠模型，差异有统计学意义（P<0.05）。6.小鼠自然流产模型和正常妊娠模型胎盘组织中Gal-9mRNA的表达差异无统计学意义（P>0.05）。7．小鼠自然流产模型的滋养细胞Gal-9+细胞百分比低于正常妊娠模型，差异有统计学意义（P<0.05）。8.Gal-9在小鼠自然流产模型和正常妊娠模型蜕膜组织中均有表达，且主要表达在细胞胞浆和细胞膜，小鼠两组模型蜕膜组织中Gal-9蛋白和mRNA的表达水平差异无统计学差异（P>0.05）。9.①小鼠自然流产模型和正常妊娠模型的蜕膜基质细胞Gal-9+细胞百分比差异无统计学意义（P>0.05）。②小鼠自然流产模型的蜕膜腺上皮细胞Gal-9+细胞百分比低于正常妊娠模型，差异有统计学意义（P<0.05）。③小鼠自然流产模型的蜕膜淋巴细胞Gal-9+细胞百分比低于正常妊娠模型，差异有统计学意义（P<0.05）。【结论】Tim-3和Gal-9在小鼠自然流产模型和正常妊娠模型的母胎界面均有表达，且当Tim-3和/或Gal-9表达异常时，可能导致复发性自然流产。【目的】将小鼠脾脏淋巴细胞、外周血淋巴细胞分别与滋养细胞共培养，以探讨Tim-3-Gal-9通路对淋巴细胞免疫应答调节的分子机制。【方法】1.用流式细胞术检测小鼠自然流产模型和正常妊娠模型脾脏淋巴细胞及外周血淋巴细胞的Tim-3和Gal-9表达。2.采用ELISA检测小鼠自然流产模型和正常妊娠模型血清中Th1型细胞因子IFN-γ和IL-2，Th2型细胞因子IL-4的表达。3.将小鼠自然流产模型和正常妊娠模型脾脏淋巴细胞、外周血淋巴细胞分别与各自的滋养细胞共培养，于共培养的第0、1、2、3、4、5、6、8、10天采用CFSE标记法检测淋巴细胞增殖情况，同时采用流式细胞术检测淋巴细胞上Tim-3和Gal-9的表达，并分别于共培养的第1、3、6、10天采用ELISA检测共培养体系上清中Th1型细胞因子IFN-γ和IL-2，Th2型细胞因子IL-4的表达。【结果】1.小鼠自然流产模型的外周血淋巴细胞Tim-3+细胞百分比高于正常妊娠模型，且差异有统计学意义（P<0.05）；小鼠自然流产模型的外周血淋巴细胞Gal-9+细胞百分比低于正常妊娠模型，且差异有统计学意义（P<0.05）。两组模型的小鼠脾脏淋巴细胞Tim-3+细胞百分比和Gal-9+细胞百分比差异均无统计学意义（P>0.05）。2.小鼠自然流产模型血清中Th1型细胞因子IL-2和IFN-γ的表达比正常妊娠模型低，差异有统计学意义（P<0.05），两组模型血清中Th2型细胞因子IL-4差异无统计学意义（P>0.05）。3.小鼠自然流产模型脾脏淋巴细胞-滋养细胞共培养体系中淋巴细胞增殖率于第1~10天均明显低于正常妊娠模型，差异具有统计学意义（P<0.05）；外周血淋巴细胞-滋养细胞共培养体系结果与脾脏淋巴细胞相同（P<0.05）。4.小鼠自然流产模型脾脏淋巴细胞-滋养细胞共培养体系中脾脏淋巴细胞Tim-3+细胞百分比与正常妊娠模型相比先升高然后逐渐降低，分别于第1天和第5天差异有统计学意义（P<0.05）；外周血淋巴细胞-滋养细胞共培养体系结果与脾脏淋巴细胞相同，分别于第0、1天和第5、6天差异有统计学意义（P<0.05）。5.小鼠自然流产模型脾脏淋巴细胞-滋养细胞共培养体系中脾脏淋巴细胞Gal-9+细胞百分比与正常妊娠模型相比先下降然后逐渐升高，分别于第1、4、5、6天和第8天差异有统计学意义（P<0.05）；外周血淋巴细胞-滋养细胞共培养体系结果与脾脏淋巴细胞相同，分别于第0、3天和第6天差异有统计学意义（P<0.05）。6.小鼠自然流产模型脾脏淋巴细胞-滋养细胞共培养体系上清中Th1型细胞因子IL-2和IFN-γ的表达高于正常妊娠模型，且于第6天差异有统计学意义（P<0.05），Th2型细胞因子IL-4的表达低于正常妊娠模型，且于第1、3、6天差异有统计学意义（P<0.05）。小鼠自然流产模型外周血淋巴细胞-滋养细胞共培养体系中IL-2和IFN-γ的表达水平与脾脏淋巴细胞-滋养细胞共培养相同，IL-4的表达水平低于正常妊娠模型，且于第1、3、6、10天差异有统计学意义（P<0.05）。【结论】Th1/Th2型细胞因子网络平衡与妊娠结局关系密切。当Tim-3和/或Gal-9表达异常时，将会导致Th1/Th2平衡被打破，从而导致复发性自然流产发生。