论文部分内容阅读
目的:观察仙灵骨葆胶囊的潜在肝毒性及其与奥美拉唑、氟他胺联合用药的肝毒性。方法:1.将健康C57小鼠随机分为四组:空白对照组、补骨脂组(相当于仙灵骨葆胶囊临床剂量中的补骨脂含量,9.25 mg/kg)、仙灵骨葆低剂量组(相当于临床剂量,308 mg/kg)、仙灵骨葆高剂量组(相当于临床8倍剂量,2464 mg/kg),每组12只,雌雄各半。灌胃给药,每天2次,连续给药6个月。2.将健康C57小鼠随机分为五组:奥美拉唑组(相当于临床剂量,8.22 mg/kg),其余各组设置及给药方案同方法1,每组6只,雌雄各半。仙灵骨葆和补骨脂灌胃给药3个月后,除空白组外,其余各组于第4个月开始腹腔注射奥美拉唑,每天1次,联合用药3个月。3.将健康雄性C57小鼠随机分组用于两个实验:一个实验为仙灵骨葆和氟他胺高剂量短期联合应用,设空白对照组、氟他胺组(相当于临床剂量2倍,300 mg/kg)、仙灵骨葆组(相当于临床剂量10倍,3080 mg/kg)、仙灵骨葆+氟他胺组,每组3-4只。灌胃给药,仙灵骨葆每天2次,在给予仙灵骨葆第6天时开始灌胃联合应用氟他胺(每天1次,给药4天)。另一个实验为仙灵骨葆和氟他胺临床剂量长期联合应用,设空白对照组、氟他胺组(相当于临床剂量,150 mg/kg)、仙灵骨葆组(相当于临床剂量,308 mg/kg)、仙灵骨葆+氟他胺组,每组3-4只。灌胃给药,仙灵骨葆每天2次,氟他胺每天1次,连续给药40天。4.给药期间定期采集小鼠尾静脉血,末次给药12小时后收集各组动物的血液和肝脏样品,测定血清谷丙转氨酶(Alanine aminotransferase,ALT)、谷草转氨酶(Aspartate aminotransferase,AST)、碱性磷酸酶(Alkaline phosphatase,ALP)、乳酸脱氢酶活性(Lactate dehydrogenase,LDH);肝脏组织病理观察药物对小鼠肝脏组织形态学的影响;RT-PCR法检测药物对小鼠肝脏细胞色素P450酶m RNA表达的影响。结果:1.与空白组比较,仙灵骨葆低剂量组小鼠血清的ALP升高。仙灵骨葆低、高剂量组肝组织炎细胞浸润。仙灵骨葆低、高剂量组诱导雄鼠肝脏Cyp1a2和Cyp2c37mRNA的表达。2.仙灵骨葆低、高剂量+奥美拉唑组小鼠肝脏可见炎细胞浸润,损伤程度与单独使用仙灵骨葆低、高剂量组相当。仙灵骨葆高剂量+奥美拉唑组雄鼠肝脏Cyp1a2和Cyp2c37 m RNA的表达增加。奥美拉唑组病理仅见肝细胞轻微水肿。补骨脂+奥美拉唑组小鼠血清的ALT升高,肝组织病理出现少量炎细胞浸润。3.氟他胺和仙灵骨葆高剂量短期联合应用后,仙灵骨葆+氟他胺组小鼠肝系数显著升高,血清中LDH活性显著增高,病理HE染色显示中央静脉扩张,血窦狭窄,细胞肿胀,大面积胞质空泡,进一步油红染色结果提示空泡病变可能为脂肪病变。氟他胺组病理仅见肝细胞轻微水肿。仙灵骨葆+氟他胺组肝脏Cyp1a2 m RNA的表达显著升高,比单用仙灵骨葆或氟他胺高3倍。仙灵骨葆和氟他胺临床剂量长期联合应用后,仙灵骨葆+氟他胺组小鼠肝系数显著升高,血清中LDH活性显著增高,肝组织病理检查显示小鼠肝细胞明显肿胀,肝细胞点状坏死,部分肝细胞核固缩。氟他胺组病理仅见肝细胞轻微水肿。结论:连续给予小鼠仙灵骨葆胶囊6个月引起小鼠肝脏组织以炎细胞浸润为特征的损伤。仙灵骨葆合用奥美拉唑肝组织病理损伤程度与单用仙灵骨葆相当。仙灵骨葆与氟他胺联用后肝毒性增加,其机制可能与仙灵骨葆诱导CYP1A2,导致氟他胺毒性代谢物增加有关。