重金属铅的免疫检测技术研究

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随着工农业迅速发展,大量的污染物进入环境引起环境质量严重恶化,其中重金属的污染尤为严重。重金属由于污染范围广,持续时间长,又不能在生物物质循环和能量交换中分解,易在已在环境中累积,而成为环境中一类重要的污染物,尤其是铅、隔污染尤为严重。铅在自然界不分解,在环境中可以长期累积,广泛分布于大气、土壤、水和食物中,通过呼吸道、消化道被人体吸收,对环境和人体健康产生严重的危害。铅也是危害生物生长范围较广的重金属,高浓度铅对植物生长发育有害。重金属不是植物生长的必需元素然而它们可以被植物吸收,从而进入食物链对动物和人体健康产生危害。这些物质对机体的危害,在短期內并不明显,但经过长期累积,会影响神经系统、内脏功能和生殖、遗传等。因此,建立快速灵敏的检测方法势在必行。以实验室成功制备的铅单克隆抗体为基础,选取一个杂交瘤细胞株系(4/7)对其培养上清进行ELISA检测。结果表明,培养上清效价为300倍稀释;亲和常数为2.19×10110L/mol;对Fe3+、Cu2+、Cd2+、Hg2+的交叉反应率依次为1.19%、2.59%、2.6%、2.49%,对其它11种金属离子的交叉反应率则均小于0.1%;包被抗原工作浓度为4000倍稀释,培养上清为5倍稀释,3%BSA作封闭物,反应基质HBS中NaCl的离子强度为0 mol/L,pH值为5.0:利用优化后的实验条件进行间接竞争ELISA检测并建立标准曲线,线性化标准曲线回归方程为Y=1.0434X-2.6768,才目关系数R2=0.9932,检测范围0.0001 mmol/L~0.1 mmol/L,检测极限值为5.6×10-6 mmol/L;批內变异系数为1.57%,批间变异系数为1.92%;自来水和超纯水中的添加回收率分别为85.7%和110.0%。
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