奶牛隐性乳房炎中药透皮剂的研制及抗菌机理探讨

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本试验将金银花、蒲公英、芙蓉花、黄芪等八味中药,按中兽医组方原则组成31个复方,分别用50%乙醇提取,石油醚萃取后取水相,采用试管二倍稀释法研究了中药提取物对奶牛隐性乳房炎主要致病菌的MIC和MBC,并筛选出有效的中药及复方,并进一步研究了金银花、复方31对小鼠金黄色葡萄球菌人工感染死亡的影响,通过中药体外对金黄色葡萄球菌超微结构和SDH比活性的影响,探讨了中药的抑菌机理。采用正交试验设计研究复方31透皮剂制备条件,在此基础上研究了其毒性、安全性、稳定性、透过率,并进行了其临床药效学试验。  抑菌活性结果显示:金银花、连翘、复方31对金黄色葡萄球菌的MIC分别为15.6、15.6、31.3 mg/mL,MBC为31.3、31.3、62.5 mg/mL;芙蓉花、复方15、16对大肠杆菌的MIC分别为31.3、15.6、15.6 mg/mL,MBC均为62.5 mg/mL;芙蓉花、复方8、31对无乳链球菌的MIC为15.6、15.6、31.3 mg/mL,MBC均为62.5 mg/mL。复方31能极显著抑制金黄色葡萄球菌引起的小鼠死亡(P<0.01)。结果表明:复方31有较好的抑制奶牛乳房炎相关菌的作用,为临床应用提供了良好的数据。  抑菌机理初探结果显示:金银花、复方31的SDH比活性均极显著低于空白对照组(P<0.01);复方31作用后的金黄色葡萄球菌细胞壁上有大量絮状物,细胞呈塌陷状,甚至细胞壁破裂。以上结果表明:复方31抑菌机制可能是改变细菌细胞的通透性,破坏细菌的细胞壁;抑制菌体内的酶系统。  结果还显示:制备的中药透皮剂最佳条件为硬脂酸12g、单硬脂酸甘油酯3.5g、羊毛脂5g、凡士林2g、石蜡6mL;三乙醇胺0.3mL;在80℃时将两相混合不断搅拌10 min,取出再于室温条件下搅拌即得;急性毒性试验表明小鼠口服给复方31药量为55.6 g/kg体重,即耐药倍数为278倍时,未见小鼠死亡;透皮剂在耐寒耐热、离心和加速试验中未见分层破乳、霉败、色泽和均匀性改变等现象,其稳定性良好;其透过率为15.1μg/cm2·h;其对皮肤刺激的平均值小于0.5,致敏率为0%;临床药效学试验表明中药透皮剂对奶牛隐性乳房炎的治愈率和有效率分别为69.0%和89.7%,与对照组差异极显著(P<0.01)。这些结果表明:制备的复方31透皮剂为无毒、无致敏性、无刺激性的外用透皮剂,对隐性乳房炎有良好的治疗效果。
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