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背景和目的 肝细胞癌（hepatocellular carcinoma，HCC）是我国最常见的恶性肿瘤之一，年死亡率为男性33.7／10万，女性12.3／10万，均居世界各国之首，严重威胁我国人民的生命健康，因而一直是我国研究的重点肿瘤之一。HCC恶性程度高，且起病隐匿、发展迅速，就诊时多为中晚期，从而严重影响疗效。因此，确定HCC高危或易感人群的分子遗传特征并进行早期筛查就显得尤为重要。 以往对HCC易感性研究限于传统流行病学，主要发现HCC的高发与人群HBV／HCV感染、黄曲霉毒素B1（aflatoxin B1，AFB1）摄入等有关。新近肿瘤研究的进展之一，是发现人类个体间基因组的分子遗传多态性可能与肿瘤易感性有关。但对HCC人群的遗传多态研究刚刚起步，我们至今对具备何种遗传多态的个体易患HCC所知甚少。 研究显示，最常见的人类遗传多态形式是基因组中散在的单个碱基的不同一单核苷酸多态性（single nucleotide polymorphisms，SNPs），占所有已知多态性的90％以上。SNPs是人类长期进化过程中由于环境的选择形成的基因点突变，同时也是人种之间、个体之间差异的遗传物质基础之一，可以导致个体间对恶性肿瘤等复杂疾病的易感性差异。若列出人群中频率较高的SNPs谱，并将它们与疾病表型进行关联分析，就有可能检出疾病易感性多态。第二军医大学中文摘要博士学位论文 根据以上分析，本研究计划对大样本的（500对以上）HCC人群和对照人群进行p53七g72pro、M6p八GFZR As心oZoser、MTHFR e677T、e伽nlA870G、E一eadherinC一160A、hOGGI Ser326Cys等6个重要SNPs位点的对比研究，期望从中找出与中国人群HCC风险相关的遗传多态特点，并寻找具有临床实际应用价值的预测和筛选HCC高危人群的分子检测谱系。方法 采用PCR一RFLp方法，对5 12例HCC和543名对照的P53 Aig72Pro、M6P/IGFZR Asn2020Ser、MTHFR C677T、CCNDI A870G、E一eadherinC-z6oA、hOGGI Ser326Cys等6个SNps的基因型进行检测，以非条件Logistie回归法计算表示相对危险度的比值比（o dds:adio，OR）及其95%可信区间（。。nfidence inierval，Cl）。OR值均以潜在的混淆因素校正。以上数据统计用统计分析软件进行（sPss，10.0版）。Hardy一Weinberg遗传平衡、等位基因特异性OR和为mltage趋势检验在Intemet提供的软件上进行（httP:// ihg.gsfde/ihg/snPs.html）。结果 1 .P53呈72Pro等位基因是HCC发生的边缘危险因素（OR=1.19，95%Cl 1 .00一1 .41，夕=0.053），Pro等位基因携带者（打g/Pro或pro/Pro）的HCC风险是Ar留Arg基因型携带者的1.33倍。与为岁为g相比，Pro用ro携带者的HeC风险显著增加至1 .79倍（95%ell，06一3.01，夕=0.029）。结果提示，pro等位基因与HCC风险增加有关，Pro爪ro基因型是中国人群HCC风险的一个遗传易感因素。 为了探讨HBsAg携带状态对p53 Arg72Pro与HCC风险关系的影响，我们对资料进行了HBsAg状态分层分析。结果显示，Pro是HBsAg阴性人群HCC第二军医大学中文摘要博士学位论文发生的危险因素（OR=1.57，95%Cl 1.19一2.06，夕=o.00x），pro等位基因携带者的HCC风险是Axg/Arg携带者的1 .94倍（95%Cl 1 .14一3.31，尸=0.015）。与Ar创Arg纯合子相比，Ar尹ro杂合子的HCC风险增加至1.67倍（95%Cl 0.95一2.92，夕=0.075），而pro用ro纯合子的HCC风险增加至3.02倍（95%el一50一6.08，尸=0.002）。趋势检验表明，pro与HCC风险呈等位基因剂量一效应关系（Ar岁Arg、Ai妙ro和Pro爪ro基因型的校正oR分别为1.00、1.67和3.02;Armitage趋势检验，夕=0.001）。另外，同时具有pro等位基因和HCC家族史两个危险因素个体的HCC风险显著增加至11 .37倍（95%cl 1.67一77.59，p二0.013），大于两危险因素单独作用的乘积（l .91与4.02的乘积），提示二者在增加HBsAg阴性人群的HCC风险中有交互作用。 另一方面，p53 Aig72pro与HBsAg阳性人群的HCC风险无关。HBsAg阳性人群的Ai尹ro或Pr。用ro与Ax留Aig基因型携带者的HCC风险没有显著差异。与此相一致的是，Pro和HBsAg两个危险因素在HCC风险中没有协同作用。结果表明，p53 Arg72Pro是HBsAg阴性人群HCC的一个遗传易感因素。 P53 Arg72Pr。与HBv清除缺陷关系的研究结果显示，Pro等位基因是HBV清除缺陷的一个边缘遗传易感因素（OR=1 .33，95%CIO.%一1 .85，p二0.092），Pro用ro纯合子的HBv清除缺陷风险是赶留Axg纯合子的1 .94倍 （95%Cl 0.95一3.96），具有边缘统计学意义，=0.068)。结果提示，pro与HBv清除缺陷有关。 2.HCC和对照两组人群中MTHFR C677T等位基因和基因型分布无显著性差异（p值分别为0.841和0.258）。然而，将C/C和C汀基因型合并计算，并将其作为参照，则T/T基因型携带者患HCC的风险显著增加1 .66倍 （95%cl 1.08一2.54，p=0.021）。性别因素分层分析结果显示，T厅基因型女第二军医大学中文摘要博上学位论文性携带者的HCC风险是C等位基因女性携带者的2.64倍（95%Cl 1 .19一5.88，p二0.017）。而在男性，T/T基因型与C等位基因携带者的HCC风险无显著差异（尸=0.237）。 3.HCC和对照两组人群中CC