长期游泳运动对幼年自发性高血压大鼠心肌细胞凋亡的影响及其作用机制初探

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研究目的:成年和高龄自发性高血压大鼠(SHR)心肌细胞均存在异常凋亡现象,长期有氧运动可以降低成年和高龄SHR心肌细胞凋亡率,但早期游泳运动对幼年SHR心肌细胞凋亡有何影响,目前尚未报道。本研究通过构建长期游泳运动模型,观察运动对幼年SHR心肌细胞凋亡的影响,并对其机制进行初步的分析,以期为高血压患者早期进行运动治疗提供动物实验依据和理论基础。研究方法:本文选择4周龄自发性高血压大鼠(SHR,n=20)和4周龄京都大鼠(WKY,n=9)为实验研究对象,将SHR随机分为高血压对照组(SHR,n=10)和高血压运动组(SHR+E,n=10),WKY(n=9)为正常对照组。SHR+E进行8周的游泳运动,每周运动六天,每天连续90min。运动结束后,摘取心脏,部分保存甲醛制石蜡切片,做细胞凋亡检测和免疫组织化学检测;部分保存液氮,利用western blot检测心脏组织中bcl-2、bax和caspase-3蛋白表达。研究结果:1、幼年自发性高血压大鼠心肌细胞凋亡实验结果表明,在荧光显微镜400X下可以观察到,自发性高血压对照组大鼠与正常对照组大鼠心肌细胞凋亡率相比,SHR 心肌细胞凋亡率明显升高(1.06667+0.02603)%VS(0.316667+0.01174)%,P<0.001;自发性高血压运动组大鼠和自发性高血压对照组大鼠心肌细胞凋亡率相比,SHR+E心肌细胞凋亡率有所减少(0.710+0.009661)%VS(1.066667+0.02603)%,P<0.001,实验结果均有显著性差异。2、免疫组织化学实验结果表明,在400X光学显微镜下观察到,自发性高血压对照组大鼠与正常对照组大鼠平均光密度值相比,bcl-2平均光密度值变化不明显(P>0.05),bax和caspase-3平均光密度值增高(P<0.05);自发性高血压+运动组大鼠和自发性高血压对照组大鼠平均光密度值相比,bcl-2平均光密度值增高,bax和caspase-3平均光密度值下降。3、western blot实验结果表明,自发性高血压对照组大鼠与正常对照组大鼠蛋白质表达的灰度值相比,bcl-2的灰度值变化无统计学意义(P>0.05),bax和caspase-3的灰度值增高,数据有差异性(P<0.05);自发性高血压运动组大鼠和自发性高血压对照组大鼠相比,bcl-2灰度值增加,bax和caspase-3灰度值有所减少,所得实验数据均有统计学意义(P<0.05)。结论:(1)幼龄自发性高血压大鼠心脏中细胞凋亡出现增多现象。(2)长期游泳运动可以抑制幼龄SHR心肌细胞凋亡率,其机制可能是通过下调心脏中Bax和Caspase-3、上调bcl-2表达实现的。
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