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栓皮栎(Quercus variabilis BI)是我国最重要的软木资源树种。开展栓皮栎体胚发生再生植株研究,对栓皮栎优良无性系快繁、遗传改良和基因资源保存具有重要意义。本文以栓皮栎优树未成熟合子胚为外植体诱导体胚,研究了体胚发生的同步化调控、体胚再生能力的保持与增殖;分析了光照条件、蔗糖浓度、植物激素、活性炭、基因型、未成熟合子胚的发育时期对体胚成熟及萌发的影响;探讨了体胚成熟过程中可溶性糖和淀粉含量的变化与体胚成熟的关系。主要结果如下: 1、起初诱导的胚性愈伤组织及处于球形期的体胚,再生能力强于其它发育时期的体胚。6-BA 与NAA 配合使用,可以延长体胚再生能力的保持时间,减轻体胚因多次继代致使再生能力下降或者丧失,其中6-BA 的浓度不能超过1.0 mg.L-1,NAA 的浓度不能超过0.2 5 mg.L-1。2、2,4-D 可以有效控制栓皮栎体胚发生的同步化,2,4-D 的浓度越高,培养基中的培养物越趋于胚性愈伤组织状态,反之,则趋于体胚发育状态。在MS 培养基中单独添加0.5 mg.L-1、1.0 mg.L-1、1.5 mg.L-1、3.0 mg.L-1 的2,4-D,能分别获得发育程度基本一致的早期子叶形体胚、心形体胚、球形体胚与胚性愈伤组织。3、栓皮栎成熟体胚的形态标志是,子叶肥厚,乳白色(象牙色)或浅黄色到黄绿色不透明,下胚轴粗壮并延伸成胚根、直径大小约为5-8 mm。高浓度的蔗糖有利于体胚成熟,但同时会导致畸形胚增加;适宜的ABA 浓度有利于体胚成熟,以0.5 mg.L-1为宜,浓度过高体胚质量下降;细胞分裂素与生长素的使用对体胚的正常成熟没有明显的促进作用,高浓度时抑制体胚的正常成熟;适当延长体胚成熟培养时间(2 个月),有利于体胚成熟;硝酸银、活性炭及PVP 对体胚的发育有促进作用,但效果不及高糖及ABA 处理;山梨醇、水解酪蛋白对体胚的成熟无促进作用;体胚成熟需要适当的光照条件;合子胚发育程度越趋于成熟,诱导的体胚越容易成熟。试验筛选确定的适合栓皮栎体胚成熟的培养基及培养条件为,在含5%蔗糖的MS 培养基中同时添加0.5 mg.L-1ABA 和0.5 mg/L PVP,光照条件下培养2 个月。按此方法可使栓皮栎体胚成熟率稳定在70%左右。4、体胚成熟过程中,可溶性总糖、蔗糖变化趋势一致,球形胚含量高,以后开始下降,心形期达到低谷,而后又开始升高,子叶形期又达到积累高峰。淀粉含量则从球形胚到子叶形成熟胚迅速升高。培养基中添加较高浓度的蔗糖,可明显增加不同发育阶段体胚的可溶性糖、蔗糖及淀粉含量。成熟体胚中可溶性总糖、蔗糖和淀粉含量分别是成熟合子胚中相应含量的1/2、1/3、1/13,由此推断,贮藏物质积累的严重不足可能是影响栓皮栎体胚萌发的主要原因之一。