热激蛋白（Heat Shock Protein,HSP）是生物体遭受胁迫时产生的一类可以对相关蛋白进行调控从而增强生物体抗性的保护性蛋白，普遍分布在各种生物体内。其中热激蛋白70（HSP70）是目前在基因和蛋白层面研究的最为深入的一种热激蛋白。三色堇（Violatricolor）花色丰富，花期颇长，是重要的花坛、盆栽观赏花卉，应用十分广泛。然而，当前绝大多数三色堇品种不耐高温导致应用受限。从较耐热三色堇种质中分离HSP70基因并进行相关生物信息学分析，对三色堇耐热性研究及培育出具有耐热新品种有重要意义。本试验以三色堇HAR为试材，对其进行42℃20min,40min,60min的热激处理，诱导HSP70基因表达。利用同源序列克隆法，在GenBank数据库中搜寻与堇菜科亲缘关系相近的植物HSP70基因序列，分析保守区域结构，设计扩增引物，应用PCR技术从三色堇HAR中扩增获得882bp的HSP70基因片段，再利用RACE技术获取三色堇HAR的HSP70基因的5’端和3’端序列，获得基因全长为2169bp，并对中间片段进行质粒连接，重组质粒构建，获得HSP70-pMD18-T重组质粒。利用生物信息学软件对三色堇HSP70全基因进行分析，最大开放阅读框长度为1950bp（124-2083bp），编码649个氨基酸。以开放为基础进行相关生物信息学分析。系统发育树分析显示，三色堇与欧洲油菜和盐芥的相似率为47%，亲缘关系较近。蛋白预测分析显示HSP70为膜外疏水蛋白，无信号肽位点，属于NBD-sugar-kinase-HSP70-Actin的超家族，与HSP70-1,HSP70-2和HSP70-3存在相似位点。