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摘要:金纳米粒子具有比表面积高、导电性优和生物相容性好等优点,为蛋白质的检测提供与其固有体系相似的微环境,表面活性大,是一种优秀的纳米催化材料。银纳米簇由几个到几十个银原子组成,尺寸小于2nm。由于尺寸效应,比表面积大,表面活性强,也是一种良好的纳米催化材料。以金纳米粒子作为核、银纳米簇作为介孔壳通过DNA杂交双链结合的AuNPs@AgNCs内米杂化物兼具两者的优势,且AuNPs和AgNCs的协同催化效应,促进了AuNPs@AgNCs纳米复合材料的催化性能。本论文基于AuNPs@AgNCs纳米复合材料优异的催化性能和导电性能,发展了一种检测PSA的电化学免疫传感器。用生物相容性好的石墨烯固定Ab1, PSA作为目标分析物,链霉亲和素(SA)修饰的AuNPs@AgNCs纳米复合物通过链霉亲和素与生物素(biotin)的特异性反应标记biotin-Ab2,通过抗原抗体的特异反应,用“三明治”夹心法构建免疫传感器。由于AuNPs@AgNCs纳米复合材料优异的电催化性能,分别将该传感器电催化还原沉积银和H2O2。由于PSA已被很多研究证明不是前列腺特异分泌,而在乳腺中也发现PSA的存在,并随着乳腺癌的发生,PSA的浓度明显增大,基于此,本实验将该免疫传感器应用到乳腺癌患者血清中检测PSA的值。由于AuNPs@AgNCs纳米复合材料能够催化银的沉积,以AuNPs@AgNCs为探针,构建了一种超灵敏的电化学免疫传感器,得到PSA的线性范围为1fg mL-1~1ng mL-1,检出限为0.2fgmL-1。由于该方法的检出限低,可以检测到乳腺癌患者血清中超低含量的PSA浓度,希望在不久的将来,对乳腺癌的早期识别和诊断有帮助。PSA是诊断前列腺癌的特有标志物,但t-PSA浓度在4~10ngmL-1之间时,诊断缺乏特异性,因为前列腺增生也会引起PSA浓度的增大。t-PSA浓度在此区域时,研究f/t-PSA的比值比研究单独的t-PSA具有更好的诊断特异性,由于AuNPs@AgNCs纳米复合物对H202表现出有效的催化还原性能,分别制备了f-PSA和t-PSA免疫传感器,并且能够同时检测出f-PSA和t-PSA的值,得到f-PSA和t-PSA的检出限分别为0.2pg mL-1和0.3pg mL-1。基于此,本实验将该传感器分别应用到前列腺癌和前列腺增生患者血清中检测f-PSA和t-PSA的值。计算出f/t-PSA比值,得到的结果与标准的ELISA—致,这将对于前列腺癌诊断灰色区域中的识别和诊断具有重要意义。