采用ERIC-PCR技术研究鸡白痢、新城疫感染雏鸡及健康鸡肠道菌群结构

被引量 : 0次 | 上传用户:zhyj747
下载到本地 , 更方便阅读
声明 : 本文档内容版权归属内容提供方 , 如果您对本文有版权争议 , 可与客服联系进行内容授权或下架
论文部分内容阅读
为了全面掌握鸡肠道微生物群落结构变化,人工感染病原微生物对雏鸡肠道菌群结构的影响以及不同类型病原微生物对菌群的影响是否存在差异,本文应用ERIC-PCR指纹图谱技术,对鸡白痢、新城疫感染雏鸡以及健康鸡的肠道菌群结构特征进行了分子生态学研究。本试验以63只4日龄健康艾维茵鸡为研究对象,随机分为9组,每组7只,分别用于建立鸡白痢沙门氏菌和鸡新城疫病理模型。1-4组分别每天每只滴喂108、109、1010、1011CFU/mL的鸡白痢沙门氏菌1mL,连续灌喂3 d,于5、9、13、17日龄采集粪样;5-8组分别点眼滴鼻法每只点滴,200、150、100、50倍稀释后的毒株F48E8,0.2mL/只,攻毒一次,于5、9、13、17日龄采粪样;第9组(对照组)每天每只滴喂0.9%生理盐水1 mL,连续灌喂3 d,于5、9、13、17、23、28、33、38日龄采粪样。由于粪便成分复杂,不仅含有动物肠道脱落细胞,而且含有未消化的食物、消化酶、黏液、胆盐、胆红素、色素、纤维素及多糖等。因此本试验采用在细胞裂解前先经过差速离心除去大部分杂质后,再使用预冷的丙酮洗2-3次,能很好地将粪便中的色素、多糖及一些有机盐等大量的PCR抑制物除去,然后用蛋白酶K裂解、酚-氯仿抽提,能提取到纯度很高的粪便DNA供PCR扩增。模板电泳结果和PCR反应结果都证实了此方法可靠而高效。以各组肠道样品中提取的细菌基因组DNA为模板,进行ERIC-PCR扩增。采用BioNumeric软件对电泳图谱进行统计分析。结果发现:对雏鸡接种沙门氏菌和NDV后,从整体水平看,ND组的菌群结构比鸡白痢组的菌群结构变化更大。组内成对相似性系数累积曲线分析:小于0.4的Cs(相似性系数)值在ND组占到了67%,而在鸡白痢组占50%。这个结果表明用F48E8,4×105ELD50/只与灌喂鸡白痢沙门氏菌3×1011CFU/只相比,前者使鸡肠道菌群结构失调更严重。在感染初期,NDV对鸡肠道菌群结构的影响比鸡白痢沙门氏菌要小,而随着时间的推移,NDV对正常菌群的影响就更大,且持续时间更长。同时也比较了鸡白痢组内及ND组内个体之间菌群结构的相似程度,结果表明ND组个体之间的菌群结构趋于相似,而鸡白痢组内个体之间的菌群结构差异较大。可能是ND组病情更严重,肠道菌群结失调更为严重,导致菌群结构趋于简单化,所以个体间的相似性概率更大。对健康鸡肠道菌群结构进行了动态监测,表明雏鸡在5日龄时,其菌群结构很不稳定,图谱的数量及其位置在发生比较大的改变;9日龄后这种变化趋势下降,到23日龄后趋于平和,表现在后期的数量及其位置变化较小。这与鸡肠道的主要正常菌群定植规律相吻合,证明采用ERCI-PCR指纹图谱技术可以动态监测动物肠道菌群结构。
其他文献
近二十年来,大学英语教学的指导思想已经从行为主义学习理论向认知学习理论过渡。这就意味着以教师为中心的传统教学法正在被以学生为中心的教学法所替代。国内外大量的研究
21世纪伊始,随着世界高等教育改革和发展,西方比较高等教育研究取得了新的进展。从研究主题看,主要集中在对高等教育公平、现代大学制度、高等教育质量提升三大核心问题的跨
目前国内地铁车辆从制造商处运送到地铁公司客户处,一般会采用铁路运输方式,因为其具有运输成本低、安全系数高、受自然气候制约小等优势。文章主要是以上海7/9号线三期地铁
现代社会竞争激烈,人与人之间关系淡漠,漠视生命的事件屡有发生,珍惜生命、实现生命价值已经成为整个社会生命价值观的主旋律。因此,生命教育成为当前对儿童青少年进行教育的
儿童忽视是对儿童的伤害。保护儿童避免受到忽视的举措需要遵循儿童最佳利益原则和必要时剥夺不合格监护人的监护资格的原则。儿童忽视保护机制涉及刑法、未成年人法庭、强制
模态分析是研究结构动力特性的一种近代方法,是系统识别方法在工程振动领域中的应用,它和有限元分析技术一起成为结构动力学的两大支柱。在桥梁工程领域,随着大跨度桥梁建设
一、案情摘要中威轮船公司(以下简称中威公司)由陈顺通于上世纪30年代初在上海设立,1940年前后歇业。"顺丰"轮、"新太平"轮(以下简称两轮)的所有权人为陈顺通。两轮由中威公司经营,船
根据一起背压式汽轮机单机试车过程中发生的支腿上翘现象,分析原因,并对处理过程进行了总结。
在西方女权运动基础上产生的众多女性主义学术流派及其理论,一方面为世界妇女运动的发展和社会变革提供了多种可资借鉴的方法和途径;另一方面,其理论内部以及各流派之间的诸
场地的不均匀沉陷是导致埋地管线破坏的重要原因之一,而埋地管线又是城市基础建设的重要组成部分,因此分析沉陷作用下埋地管线的反应和破坏过程是必要的。本论文通过对遭遇沉陷