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THEMIS(Thymus expressed molecule involved in selection)蛋白是影响 T 细胞发育,参与TCR信号转导精细调节的一个重要分子。THEMIS蛋白仅仅表达于T淋巴细胞系,在T细胞发育过程中,THEMIS最先表达于双阴DN期细胞,在DP细胞期表达量达到最高。随着胸腺选择的发生,THEMIS在成熟的CD4+/CD8+SP细胞和外周T细胞中表达量逐渐下降。虽然我们已经知道THEMIS在T细胞发育中发挥着重要的作用,但目前对于其在T细胞亚群中差异性表达的分子调控机制及功能域的研究还十分匮乏。叉头状蛋白3(FOXP3)是CD4+CD25+ Treg细胞的标志性转录因子,对维持Treg细胞功能与调节免疫反应发生中起着重要的作用。研究发现FOXP3的表达能抑制诸多与TCR信号通路相关基因的正常转录,其中就包括THEMIS蛋白。但FOXP3与THEMIS相互作用的分子机制仍不清楚。探究FOXP3与THEMIS的关系,阐明其分子调控机制有助于我们理解THEMIS在胸腺发育中的动态变化,并进一步解析其细胞组织表达特异性的原因。在本论文中,我们利用一系列分子生物学方法,在细胞和分子水平上深入地研究人源THEMIS在PMA/ionomycin刺激下的调控机制。首先,我们通过序列比对证实了 THEMIS具有严格的细胞及组织表达特异性,并具体定位了 THEMIS的核心启动子序列。我们观察到FOXP3能抑制PMA/ionomycin对THEMIS的诱导表达,但这种抑制作用却不依赖于FOXP3与启动子序列的直接结合。我们还发现NF-κB的亚基p65通过与THEMIS核心启动子的结合促进了其对PMA/ionomycin的应答,并进一步发现FOXP3能抑制p65的入核,最终抑制THEMIS的表达。我们发现的FOXP3对THEMIS的调控方式为以后更深入的研究提供了理论基础。