水通道蛋白在糖尿病大鼠阴道组织的表达

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目的:当前糖尿病发病率日益增高,其并发症也多种多样,此中女性性功能障碍就是其导致女性糖尿病患者生活质量降低的诸多并发症之一。女性糖尿病患者阴道润滑性降低的原因尚未清楚,本研究将探讨女性糖尿病患者高血糖因素对阴道组织中水通道蛋白影响,以阐明所有AQPs亚型的表达与高血糖的关系,了解水通道蛋白在女性糖尿病患者性功能中的影响。方法:6星期大健康雌性SD大鼠(n=24)适应实验室环境喂养2个星期后,将其随机分为四组,分别为4周糖尿病组、4周对照组、6周糖尿病组和6周对照组,每组6只。禁食12小时后实验组给予浓度为1%的链脲佐菌素按照55mg/kg的剂量单次注入腹腔,其余大鼠予以腹腔注射入相当剂量柠檬酸缓冲液,三天后检测血糖,血糖升高并大于16.8mmol/L、体重降低、多饮多尿等表现则表明本实验中糖尿病模型是成功的。定期监测大鼠血糖及体重,测定血糖前应限制饮食12小时不限制饮水。测定血浆雌二醇水平、阴道分泌液体的重量,雌性大鼠阴道组织中AQP0、AQP5、AQP6、AQP10、AQP11、AQP12等水通道蛋白的表达部位及其相应表达量。结果:糖尿病4周组大鼠血糖(29.07±3.67mmol/l)和糖尿病6周组大鼠(28.15±5.92mmol/l)分别较对照4周组大鼠血糖(5.67±1.11mmol/l)和对照6周组大鼠血糖(5.63±0.92mmol/l)均显著增高(P<0.05),而糖尿病4周组大鼠体重(192±6.07g)和糖尿病6周组大鼠体重(198±3.83 g)分别较对照4周组大鼠体重(249±7.62g)及对照6周组大鼠体重(267±11.41g)显著降低(p<0.05)。阴道润滑性的表达由对盆神经进行电刺激后所得分泌物量与阴道的重量之比表示,糖尿病4周组大鼠(2.12±1.41)较对照4周组大鼠(4.21±0.86)显著降低(p<0.05),糖尿病6周组大鼠(2.64±0.88)较对照6周组大鼠(4.41±0.77)显著降低(p<0.05)。免疫组化显示aqp0主要表达在阴道上皮细胞细胞质内,western印迹显示aqp0在大鼠阴道组织中表达的相对光密度值糖尿病4周组大鼠(29.74±7.21)较对照4周组大鼠(116.62±3.21)显著降低(p<0.05),糖尿病6周组大鼠(31.56±7.18)较对照6周组大鼠(102.59±9.59)显著降低(p<0.05),免疫组织化学显示大鼠阴道组织中aqp5在血管内皮和间质细胞的胞核中表达,western印迹显示aqp5在大鼠阴道组织中表达的相对光密度值糖尿病4周组大鼠(36.31±2.53)较对照4周组大鼠(100.62±2.76)显著降低(p<0.05),糖尿病6周组大鼠(35.39±3.42)较对照6周组大鼠(106.14±5.39)显著降低(p<0.05),免疫组化显示aqp6主要在阴道毛细血管及静脉内皮细胞胞浆表达,western印迹显示aqp6在大鼠阴道组织中表达的相对光密度值糖尿病4周组大鼠(68.42±5.48)较对照4周组大鼠(106.78±3.64)显著降低(p<0.05),糖尿病6周组大鼠(67.42±1.97)较对照6周组大鼠(110.22±1.47)显著降低(p<0.05),aqp10在大鼠阴道组织中表达的相对光密度值糖尿病4周组大鼠(24.63±1.14)较对照4周组大鼠(84.34±4.32)显著降低(p<0.05),糖尿病6周组大鼠(28.49±2.02)较对照6周组大鼠(87.7±5.72)显著降低(P<0.05);免疫组化结果显示,aqp11主要表达在阴道内的毛细血管和静脉内皮细胞,Western印迹显示AQP11在大鼠阴道组织中表达的相对光密度值与内参照的比值显示糖尿病4周组大鼠(26.86±2.9)较对照4周组大鼠(93.27±12.25)显著降低(P<0.05),糖尿病6周组大鼠(27.15±2.44)较对照6周组大鼠(94.27±10.2)显著降低(P<0.05),AQP12在大鼠阴道组织中表达的相对光密度值糖尿病4周组大鼠(29.98±8.41)较对照4周组大鼠(94.57±10.47)显著降低(P<0.05),糖尿病6周组大鼠(34.4±11.2)较对照6周组大鼠(91.37±19.67)显著降低(P<0.05)。结论:糖尿病大鼠阴道润滑性显著低于正常大鼠。血糖与大鼠阴道组织中AQP0、AQP5、AQP6、AQP10、AQP11、AQP12的表达呈负相关。糖尿病大鼠阴道润滑性降低可能与AQP0、AQP5、AQP6、AQP10、AQP11、AQP12的表达水平相关。
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