抗生素在养殖场中的大量使用造成了耐药菌株的频繁出现,给临床治疗和疾病防控带来巨大挑战。近年来,随着碳青霉烯类药物耐药革兰氏阴性菌株不断出现,使得黏菌素重新被用于治疗多重耐药菌感染,但黏菌素耐药菌株也在不断出现。过去认为黏菌素耐药性由染色体介导,2015年质粒介导的黏菌素耐药基因mcr-1被中国学者发现以后,快速成为研究热点。本研究旨在了解猪源大肠杆菌的耐药性变化趋势和mcr-1基因的流行情况,为减缓细菌耐药发展提供一定的实验数据。2014年~2017年,从广东、河南、辽宁三个省份共采集2780份猪肛拭子,分离得到大肠杆菌1992株,其中广东屠宰场764株,广东某养殖场635株,河南某养殖场271株,辽宁屠宰场322株。采用琼脂稀释法检测1992株大肠杆菌对14种抗菌药的敏感性,结果显示猪源大肠杆菌对氨苄西林、四环素、多西环素、氟苯尼考的耐药率都达到了70%以上;对安普霉素、庆大霉素、环丙沙星的耐药率也在10%~30%之间;对头孢菌素类药物和阿米卡星的耐药率较低;除黏菌素外,辽宁屠宰场来源的大肠杆菌对各种抗菌药的耐药率均低于广东屠宰场。广东屠宰场中对氟苯尼考的耐药率呈逐年上升趋势,而对环丙沙星的耐药率呈逐年下降趋势;除河南某养殖厂外,猪源大肠杆菌对黏菌素的耐药率从2016年开始呈下降趋势;河南某养殖场对于庆大霉素的耐药率呈逐年上升的趋势;辽宁屠宰场对安普霉素的耐药率呈逐年降低的趋势,而对于氟苯尼考和庆大霉素都是从2015年开始呈下降趋势。采用PCR方法检测黏菌素耐药基因mcr-1,结果显示735株黏菌素耐药菌株有610株检测到mcr-1基因,其中广州某屠宰场连续4年的检出率分别为8%、39%、31%和14%,广州某养殖场的检出率分别为26%、45%、25%和10%,河南某养殖场的检出率分别为18%、48%、94%和1%,辽宁某屠宰场的检出率分别为37%、68%、46%和14%。选取两个养殖场共95株耐黏菌素菌株进行接合转移实验,共得到51株接合子。对51株接合子进行质粒复制子基因分型,结果共检测到4种质粒,以IncX4质粒为主(35/51),其次为IncHI2(6/51)和IncI2(8/51)型质粒。本研究表明,猪源大肠杆菌耐药情况严重,主要是对氨苄西林、四环素、多西环素和氟苯尼考耐药率高,对黏菌素的耐药率在2015年达到最高,在2017年明显下降,且mcr-1是黏菌素耐药的主要机制,IncX4型质粒是介导mcr-1基因在养殖场传播的主要载体。