【摘 要】
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目的:以急性髓性细胞白血病细胞HL-60细胞凋亡作为研究终点,利用荧光探针JC-1观察HL-60细胞凋亡线粒体膜电位的变化,同时用荧光探针Calcein AM荧光染色检测线粒体通透转换孔
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目的:以急性髓性细胞白血病细胞HL-60细胞凋亡作为研究终点,利用荧光探针JC-1观察HL-60细胞凋亡线粒体膜电位的变化,同时用荧光探针Calcein AM荧光染色检测线粒体通透转换孔开放的程度。方法:正常培养HL-60细胞,浓度调节至1.5×105 /ml,按照不同的处理方法进行分组:1.对照组:仅在无依托咪酯的正常培养基中培养24h;2.损伤组:用含500μM依托咪酯的培养基刺激24h。收集细胞后,流式细胞仪利用荧光探针JC-1检测细胞线粒体膜电位的改变,荧光探针Calcein AM荧光染色检测线粒体通透转换孔开放的程度。结果: JC-1检测细胞线粒体膜电位改变的实验结果显示,损伤组绿色荧光细胞数目占全部细胞的比例为41.72%,明显高于对照组3.53%;线粒体通透转换孔开放(MPTP)试验中,损伤组平均荧光强度为3.54,明显低于对照组荧光强度33.71。结论:高浓度依托咪酯诱发HL-60细胞凋亡的途径之一为通过激活线粒体通透转换孔开放改变线粒体膜电位,JC-1结合流式细胞仪是一种理想的检测线粒体膜电位的手段。
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