牦牛大肠埃希氏菌病,是严重危害牦牛养殖业的重要疾病,据统计,该病发病率为10.1%,死亡率为2.5%,致死率为45.0%。由于血清型复杂及抗生素的大量使用,耐药菌株不断增加,同时对牦牛肠道正常寄居的菌群造成不良影响,给防制工作及牦牛的健康状况带来了巨大困难和影响。基于此,很有必要对该病病原菌的生物学特性进行研究,找出发病规律及致病机理,为该病的防制打下了良好基础。西藏牦牛大肠埃希氏菌(西藏-9903),经常规方法培养、形态染色、鞭毛的运动性检查、菌毛电镜观察等,其培养特性和形态特征均与标准大肠埃希氏菌菌种(C83907)相似,符合大肠埃希氏菌特征。经生理生化鉴定,其结果也均符合本菌特性。西藏-9903和C83907对家兔肌肉接种,均具有高致病性,致死率均为100 %。分别从致死家兔的肝、脾、肾、肺、心血和淋巴结中分离回收到与接种相同的细菌。以西藏-9903和C83907致死家兔的心血涂片、革兰氏染色,在油镜下观察,可以看出西藏-9903及C83907对血细胞表现为强吸附,每一个血细胞均吸附13个左右的西藏-9903或C83907。通过玻板凝集试验和试管凝集试验,测定出西藏-9903的血清型为O26、O142、O148和O158混合型。通过对西藏-9903菌株和C83907黏附素的测定,红细胞凝集谱测定试验表明,西藏-9903只能凝集家兔红细胞,血凝谱窄,凝集价为29,C83907能凝集家兔、鸡、鸭、猪红细胞,血凝谱广,凝集价分别为29、211、28、28;通过对西藏-9903菌株和C83907进行菌毛小肠上皮细胞刷状缘黏附试验,结果表明,每一个乳兔小肠上皮刷状缘细胞至少能吸附7个菌细胞,二者均能较强或强黏附于刷状缘细胞上。应用兔回肠结扎试验对西藏-9903菌株和C83907的产LT的能力进行检测,发现二者结果均为阳性,说明均具备产生LT的能力,因此,我们用SDS-PAGE法对两者提纯后的LT进一步检测是可靠的,通过SDS-PAGE电泳图谱可看出,二者分子量均为25 000Da和12 500Da两个区带,分别是LT的A、B两个亚单位的分子量。胞外蛋白酶活性试验及溶血素测定试验,前者西藏-9903菌株和C83907检测结果为阳性,后者测定均无溶血素产生,检测结果均为阴性。选用西藏-9903菌株制备牦牛大肠埃希氏菌多价油佐剂甲醛灭活疫苗,经各项质量检查为合格,进行临床试验,结果表明,该疫苗可诱导家兔、牦牛产生特异性抗体,并具有良好的免疫原性。该疫苗为预防该病奠定了基础。