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目的:本论文选取人三阴性乳腺癌MDA-MB-231细胞为实验模型,探讨了钙离子感应器基质交感分子1(Stromal sympathetic molecule 1,STIM1)缺失的乳腺癌MDA-MB-231细胞外泌体对脐静脉内皮细胞(human umbilical vein endothelial cell,HUVEC)血管生成的作用及机制,为乳腺癌的临床诊断及治疗提供新的理论依据和实验基础。方法:1.利用MTT实验检测钙离子载体A23187、钙库操作性钙离子通道(StoreOperated Calcium Entry,SOCE)抑制剂SKF96365对MDA-MB-231细胞及其来源外泌体对HUVEC的增殖作用的影响。2.利用流式细胞术检测A23187、SKF96365对MDA-MB-231细胞周期、凋亡的影响。3.利用细胞划痕实验检测A23187对MDA-MB-231、其来源外泌体、SKF96365处理MDA-MB-231外泌体及其STIM1缺失MDA-MB-231细胞外泌体对HUVEC细胞迁移的影响。4.利用HUVEC细胞在基质胶上的管腔形成实验检测A23187和SKF96365处理后及其STIM1缺失的MDA-MB-231细胞来源外泌体对肿瘤血管生成的影响。5.利用荧光定量PCR检测MDA-MB-231细胞、其来源外泌体及外泌体作用HUVEC时HUVEC细胞中,血管生成相关miRNA的含量变化。6.利用CRISPR/Cas9技术建立STIM1缺失MDA-MB-231细胞系。7.利用Western blot检测SKF96365处理MDA-MB-231分泌外泌体及STIM1缺失MDA-MB-231来源的外泌体对胰岛素受体底物(Insulin Receptor Substrate1,IRS-1)的表达及相关通路蛋白c-Raf、ERK、p38、Akt、mTOR磷酸化水平的影响。8.利用荧光定量试剂盒检测在MDA-MB-231细胞中A23187、SKF96365及STIM1缺失对钙离子内流的影响。结果:1.人三阴性乳腺癌MDA-MB-231细胞来源外泌体可剂量依赖性的方式促进HUVEC细胞增殖和血管生成,但对乳腺癌细胞本身无增殖促进作用。2.A23187增加MDA-MB-231细胞内钙离子水平,促进其分泌的外泌体含量,促进HUVEC细胞血管生成和迁移,促进内皮屏障的开放。3.SKF96365降低MDA-MB-231细胞内钙离子水平,其分泌的外泌体抑制HUVEC细胞血管生成和迁移,抑制内皮屏障的开放。4.SKF96365处理的MDA-MB-231细胞、其分泌的外泌体及外泌体作用于HUVEC细胞中miR-145含量均显著上调,并且SKF96365处理的MDA-MB-231细胞来源外泌体处理到HUVEC时IRS-1的表达及相关通路蛋白c-Raf、ERK、p38、Akt、mTOR磷酸化水平也显著下调。5.STIM1缺失MDA-MB-231细胞来源的外泌体抑制HUVEC血管形成,且STIM1缺失MDA-MB-231细胞来源外泌体处理到HUVEC时IRS-1的表达及相关通路蛋白c-Raf、ERK、p38、Akt、mTOR磷酸化水平均下调。6.利用miR-145 antagomir验证了STIM1缺失MDA-MB-231细胞来源的外泌体miR-145通过靶向抑制ISR-1实现抑制HUVEC血管形成的作用。结论:1.MDA-MB-231细胞内钙离子上升时所释放的外泌体促进肿瘤血管生成,反之胞内钙离子浓度下降时所释放的外泌体抑制肿瘤血管生成。2.体外实验证明STIM1缺失MDA-MB-231细胞来源的外泌体miR-145通过靶向抑制ISR-1实现抑制HUVEC血管形成的作用。