【摘 要】
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肿瘤是人类健康的重大威胁之一。AGR2是一种二硫键异构酶,在多种肿瘤中超量表达,并与肿瘤的生长、转移和耐药性有着密切的关系,因此,AGR2是潜在的抗肿瘤治疗靶标。虽然针对AG
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肿瘤是人类健康的重大威胁之一。AGR2是一种二硫键异构酶,在多种肿瘤中超量表达,并与肿瘤的生长、转移和耐药性有着密切的关系,因此,AGR2是潜在的抗肿瘤治疗靶标。虽然针对AGR2的单克隆抗体具有特异性强,副作用小的特点,但是鼠源的AGR2单克隆抗体具有免疫原性的问题。经过人源化改造的Agtuzumab人源化单克隆抗体能够解决这个问题,有望成为新型抗肿瘤候选药物。Agtuzumab的成药性研究中,首先要解决抗体大规模表达的问题,因此必须建立高产、稳定的抗体表达平台。本研究的目的在于建立人源化单克隆抗体Agtuzumab的哺乳动物细胞表达平台,通过筛选获得高产、稳定细胞株,探究Agtuzumab的生产工艺,推动Agtuzumab抗体进入临床前研究。本研究报道了通过荧光可视化双筛选系统筛选获得高产、稳定的Agtuzumab表达CHO细胞株,筛选完成后,通过转染Cre重组酶的表达DNA片段切除荧光筛选标签,经过无血清悬浮补料培养工艺和抗体纯化工艺的初步研究,初步建立了Agtuzumab抗体哺乳动物细胞表达平台。应用该平台,获得纯化后的Agtuzumab人源化抗体,对其进行了表观亲和力等理化性质的表征和抗肿瘤活性的初步检测。本研究的研究结果对Agtuzumab的临床前研究和生产工艺研究提供了物质基础和理论指导。
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