杀虫剂对中华蜜蜂解毒酶酶活及解毒基因表达的影响

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中华蜜蜂(Apis cerana cerana)是我国重要的本土蜂种资源。但由于近年来杀虫剂的干扰,导致了我国中华蜜蜂种群数量减少和蜂产品质量降低,影响我国养蜂业的健康发展。本研究选取较为常用的杀虫剂作为胁迫源,对中华蜜蜂进行杀虫剂胁迫试验,研究不同杀虫剂对于中华蜜蜂主要解毒酶酶活和解毒相关基因表达变化的影响。研究结果如下:(1)通过对成都地区杀虫剂的使用及其对蜜蜂影响的走访调查,发现蜜源植物种植户有488户(97.6%)使用杀虫剂,主要使用的杀虫剂为有机磷类,有193户(38.6%)。在杀虫剂释放地方圆0到3 km内有蜜蜂养殖情况的有413户(82.6%)。杀虫剂喷洒后蜜蜂会出现死亡,但是仅有3户(6.0%)对蜜蜂进行了有效的处理。在常用杀虫剂对于蜜蜂死亡数的研究中,蜜蜂的死亡主要是集中在杀虫剂喷洒后第12 h至第24 h。(2)使用了LD50浓度的6种杀虫剂对蜜蜂进行胁迫,使用Car E酶,Ach E酶及GSTs酶酶活试剂盒对受胁迫蜜蜂腹部进行酶活测定,结果表明:对蜜蜂Car E酶酶活,氯氰菊酯的影响最大(30.15±0.09 U/mg),为正常对照组表达量的31.4倍,辛硫磷的影响最小(11.89±0.08 U/mg),为正常对照组的9.56倍。对蜜蜂Ach E酶酶活,氯氰菊酯的影响最大(2.40±0.01 U/mg),为正常对照组表达量的3.28倍,吡虫·高氯氟的影响最小(0.49±0.03 U/mg),为正常对照组的0.58倍。对蜜蜂GSTs酶酶活,氯氰菊酯的影响最大(469.39±3.61 U/mg),为正常对照组表达量的16.40倍,吡虫·高氯氟的影响最小(72.62±0.54 U/mg),为正常对照组的2.53倍。(3)使用LD50浓度的6种杀虫剂对蜜蜂进行胁迫,采用RT-q PCR方法检测受迫蜜蜂头部的CAT基因,P450基因,SOD1基因及Trx2基因的表达情况,结果表明:对蜜蜂CAT基因,辛硫磷对CAT基因的表达影响最大,为正常对照组表达量的16.40倍,吡虫·高氯氟的影响最小,为正常对照组的1.66倍。对蜜蜂P450基因,辛硫磷对P450基因的表达影响最大,为正常对照组表达量的10.52倍,甲氰菊酯的影响最小,为正常对照组的3.30倍。对蜜蜂SOD1基因,吡虫·高氯氟使SOD1基因的表达上调,为正常对照组表达量的10.47倍,敌敌畏使SOD1基因的表达下调,为正常对照组的0.48倍。对于蜜蜂Trx2基因,吡虫·高氯氟对Trx2基因的表达影响最大,为正常对照组表达量的9.01倍,敌敌畏的影响最小,为正常对照组的1.56倍。综上所述,本试验测定受杀虫剂胁迫后的中华蜜蜂相关解毒酶酶活和解毒基因的表达情况,探究了相关指标的变化情况,为进一步研究相关酶或基因参与到降解外源有害物质的调控机制的过程和中华蜜蜂资源的保护提供了一定的基础数据。
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