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为了明确实验区块内源微生物种类和相对含量,采用PCR-DGGE方法对新疆克拉玛依油田七中区和七西区油藏微生物群落结构进行了解析,并从七中区油藏中富集选育出一株石油烃降解菌ZQ-4。通过16SrRNA初步鉴定为迪茨氏菌属,命名为Dietzia sp.ZQ-4。
对Dietzia sp.ZQ-4作用原油的基本性能进行了研究。气相色谱分析表明,菌株ZQ-4具有较广的石油烃降解范围(C12-C30),且优先降解长链烷烃。ZQ-4以原油为碳源生长过程中产生物表面活性剂,发酵液表面张力降低58.5%。薄层层析和红外光谱分析表明,菌株产生的表面活性剂为脂肽类物质,性能稳定,能够耐受范围较宽的pH、温度、盐度等环境条件,在微生物采油方面具有良好的应用前景。
对七西区油藏进行了内源微生物激活实验,以了解油藏从好氧到厌氧过程中不同激活剂对微生物群落的演化及其作用的影响。设计添加13种不同营养激活剂分别在好氧、兼性厌氧培养后,分析其群落结构及其代谢产物的变化;兼性厌氧阶段又采取了两种不同的培养物培养。结果表明,不同激活剂在不同的培养阶段会导致原油作用效果及其微生物群落结构变化的巨大差异。好氧阶段,激活后微生物类群存在的主要差别为:只加无机盐条件下的微生物类群主要为无色杆菌属(Achromobacter sp.);只加糖粉时主要为丛单胞菌属(Comamonas sp.)和无色杆菌属(Achromobacter sp.),而只加复合糖粉或玉米粉则为假单胞菌属(Pseudomonas sp.);兼性厌氧阶段在多种营养条件下微生物的类群较为丰富,主要菌群均为无色菌属(Achromobacter sp.)。同时对无机盐及复合糖粉激活的古生菌构建了克隆文库,结果差异显著。兼性厌氧条件方法一时的复合糖粉激活剂主要激活甲烷食甲基菌,且甲烷和丁烷含量最大,对于原油降解表面张力的能力也最强;方法二复合糖粉激活的微生物类群主要以氢营养型和甲基营养型占据优势;与复合糖粉相比,无机盐可以激活乙酸营养型产甲烷菌。综合来看,经复合糖粉激活后的内源微生物对原油的降解效果以及后期产甲烷效果均为最佳,因而在内源微生物采油过程中可以考虑复合糖粉的应用。