3T3－L1前脂肪细胞生长至接触抑制后，用胰岛素、地塞米松和磷酸二酯酶抑制剂－1-甲基-3-异丁基次黄嘌呤（IBMX）进行诱导会分化为脂肪细胞。诱导分化的早期细胞会进行约两轮的细胞分裂，被称为克隆扩增。克隆扩增以前一直被认为可能有利于染色体的重构以易化分化所需要的基因表达，因此克隆扩增可能是3T3－L1前脂肪细胞分化所必需的过程。有报道用药物抑制了克隆扩增的同时抑制了细胞的分化。我们发现克隆扩增是仅由胰岛素诱导引起的。用地塞米松和IBMX对细胞进行诱导不发生克隆扩增，而细胞也能部分分化，分化形成的脂肪细胞未经过DNA复制。我们用有丝分裂原激活蛋白激酶激酶（MAPKK/MEK1）的抑制剂PD98059与诱导分化激素及药物一起对细胞诱导分化，克隆扩增不发生，但细胞分化未受影响。在此过程中有丝分裂原激活蛋白激酶（MAPK/ERK1,2）的活性被抑制。这些结果说明克隆扩增和DNA复制并不是3T3－L1前脂肪细胞分化的必需步骤。